UkrReferat.com
найбільша колекція україномовних рефератів

Всього в базі: 75843
останнє поновлення: 2016-12-04
за 7 днів додано 10

Реферати на українській
Реферати на російській
Українські підручники

$ Робота на замовлення
Реклама на сайті
Зворотній зв'язок

 

ПОШУК:   

реферати, курсові, дипломні:

Українські рефератиРусские рефератыКниги
НазваПолімеразна ланцюгова реакція (копіювання ДНК) (реферат)
АвторPetya
РозділБіологія, зоологія, ботаніка, аграрна наука
ФорматWord Doc
Тип документуРеферат
Продивилось3903
Скачало565
Опис
ЗАКАЧКА
Замовити оригінальну роботу

Реферат на тему:

 

Полімеразна ланцюгова реакція (копіювання ДНК)

 

Вступ

 

Уперше склад інгредієнтів, що входять у реакційну суміш для постановки

полімеразної ланцюгової реакції, і основні принципи використання

праймерів (коротких штучно синтезованих молекул ДНК) для одержання копій

ДНК були описані Kleppe із співавт. у 1971 році. Однак тоді ще не була

продемонстрована основна риса ПЛР - експонентне збільшення кількості

копій фрагмента вихідної ДНК як результат реакції.[10] Це було здійснено

в 1985 р. на фірмі Cetus. Наступне використання в ПЛР термостабільної

ДНК-полімерази  істотно розширило можливості її застосування, як у

наукових цілях, так і в клініці.[1]  У 1985 році Saiki із співавт.

опублікували статті, у якій була описана ампліфікація геномної

послідовності b-глобіна. З цього моменту кількість публікацій, у яких

автори повідомляли про застосування ПЛР у своїх роботах, стало

збільшуватися в геометричній прогресії. Метод став настільки популярний,

що сьогодні уже важко представити роботу в області молекулярної біології

без його використання. Особливо бурхливий розвиток метод полімеразної

ланцюгової реакції одержав завдяки міжнародній програмі «Геном людини».

Були створені сучасні лазерні технології секвенування (розшифровки

нуклеотидних послідовностей ДНК). Якщо в недавнім минулому для

розшифровки послідовності ДНК розміром у 250 пару нуклеотидів (п.н.) був

потрібна тиждень, то сучасні лазерні секвенатори дозволяють визначати до

5000 п.н. у день. Це у свою чергу сприяє значному росту інформаційних

баз даних, що містять послідовності ДНК. В даний час запропоновані

всілякі модифікації ПЛР, показана можливість створення тест-систем для

виявлення мікроорганізмів, виявлення крапкових мутацій, описані десятки

різних застосувань методу.[10] Ми коротенько розглянемо теоретичні

основи ПЛР і застосування цього методу для молекулярно-генетичного

дослідження зразків тканин. Основна увага буде приділено практичним

аспектам, важливим для аналізу звичайних тканинних зразків.

 

Полімеразна ланцюгова реакція

 

ПЛР - це здійснювана in vitro специфічна ампліфікація нуклеїнових

кислот, ініційована синтетичними оліго-нуклеотидними праймерами; основні

її етапи представлені на мал. 2. ПЛР-цикл складається з теплової

денатурації ДНК, її отжога з праймером і подовження ланцюга (елонгації);

зміна цих етапів відбувається в результаті простої зміни температури.

Праймери при цьому орієнтуються на матриці так, що число раундів

реплікації росте експоненціально, відповідно збільшується і число копій

специфічної нуклеотидної послідовності.

 

Застосування молекулярних методів для цілей клінічної діагностики

обмежується їхньою невисокою чутливістю і тривалістю аналізу. Так, для

виявлення нуклеїнової кислоти-мішені методом гібридизації in situ із

застосуванням радіоактивно  міченого зонда необхідно, щоб мішень була

присутня в препараті в декількох тисячах копій. Нерідке число аномальних

послідовностей у клінічному препараті діагностично-значимо, але менше

цієї величини і гібридизація може дати помилко негативний результат. На

-----> Page:

0 [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7]

ЗАМОВИТИ ОРИГІНАЛЬНУ РОБОТУ