.

Дослідження впливу пробіотиків на організм лабораторних тварин за умов експериментальної цинкової інтоксикації (автореферат)

Язык: украинский
Формат: реферат
Тип документа: Word Doc
155 3229
Скачать документ

НАЦІОНАЛЬНА АКАДЕМІЯ НАУК УКРАЇНИ

ІНСТИТУТ МІКРОБІОЛОГІЇ І ВІРУСОЛОГІЇ ім. Д.К. ЗАБОЛОТНОГО

КРИВЦОВА МАРИНА ВАЛЕРІЇВНА

УДК 579.852.1+546.47+616.34-008.8+577.121

Дослідження впливу пробіотиків на організм лабораторних тварин за умов
експериментальної цинкової інтоксикації

03.00.07-мікробіологія

АВТОРЕФЕРАТ

дисертації на здобуття наукового ступеня

кандидата біологічних наук

Київ – 2006

Дисертацією є рукопис

Робота виконана в Ужгородському національному університеті Міністерства
освіти і науки України

Науковий керівник: доктор біологічних наук, професор,

академік АНВШ України

Ніколайчук Віталій Іванович

Ужгородський національний університет,

завідувач кафедри генетики, фізіології рослин і мікробіології

Офіційні опоненти: доктор біологічних наук, професор

Федоровська Олена Олексіївна,

Інститут гематології та трансфузіології АМН України,

завідувач лабораторії мікробіології

та проблем антиінфекційного імунітету

кандидат біологічних наук,

старший науковий співробітник

Сафронова Лариса Анатоліївна,

Інститут мікробіології і вірусології

ім. Д.К. Заболотного НАН України,

старший науковий співробітник відділу антибіотиків

Провідна установа: Інститут мікробіології та імунології ім. І. І.
Мечникова, АМН України, м. Харків

Захист відбудеться “15” лютого 2006 р. о 1200 годині на засіданні
спеціалізованої вченої ради Д 26.233.01 по захисту докторських
дисертацій при Інституті мікробіології і вірусології ім. Д.К.
Заболотного НАН України за адресою: Д 03680, м. Київ, ДСП, вул.
Заболотного, 154, тел. 526-11-79

З дисертацією можна ознайомитись у бібліотеці Інституту мікробіології і
вірусології ім. Д.К. Заболотного НАН України за адресою Д 03680, м.
Київ, вул. Заболотного, 154.

Автореферат розіслано “29” грудня 2005 р.

Вчений секретар

спеціалізованої вченої ради,

кандидат біологічних наук Л.М. Пуріш

Загальна характеристика роботи

Актуальність теми. На сьогоднішній день відомо, що порушення якісного та
кількісного складу нормальної мікрофлори кишечнику супроводжують різні
за етіологією патологічні стани. Зміни мікробіоценозу кишечнику можуть,
в свою чергу, спричинювати низку порушень метаболічного та імунного
статусу [Веселов А.Я., 1988; Федоровская Е. А., 1999], на користь чого
свідчить наявність тісного зв’язку між нормальною мікрофлорою організму,
його імунною реактивністю та перебігом багатьох біохімічних процесів
[Cebra J.J., 1999]. Порушення складу нормальної мікрофлори виникають
внаслідок інфекційного захворювання, стресу, прийому антибіотиків,
хіміопрепаратів, дії радіаційного випромінювання, отруєнь,
нераціонального харчування та багатьох інших екзо- та ендогенних
факторів [Смирнов В.В. та ін., 1994; Веселов А.Я., 1988; Бондаренко В.М.
и др., 1998]. Однак на сьогоднішній день все більшу увагу дослідників
привертає значення техногенної забрудненості довкілля у розвитку
дисбактеріозу кишечнику [Кулагина Г.М. и др., 2004; Римарчук Г.В.,
1999]. Саме тому особливого значення набуває дослідження впливу важких
металів при їх надмірному надходженні в організм на нормальну мікрофлору
кишечнику.

Зокрема, цинк – мікроелемент, який у фізіологічних концентраціях є
необхідним для нормальної життєдіяльності організму [Надеенко В.Г. и
др., 1999], проте у концентраціях, що перевищують гранично-допустимі
нормативні рівні, сполуки цинку володіють токсичністю для живих
організмів [Левина Е.Н., 1972]. Показано, що інтоксикація солями цинку
призводить до низки порушень показників біохімічного статусу [Котляров
А. И., 1969; Войнар А.О., 1953], однак питання стосовно впливу цинкової
інтоксикації на мікробіоценоз кишечнику не вивчалось.

Актуальність даної проблеми для населення Закарпаття обумовлена, перш за
все, підвищеним вмістом важких металів у ґрунтах прилеглих до ріки Тиса
районів області в результаті аварій на гірничодобувних підприємствах
Румунії. На забруднених територіях виявлено значне перевищення
гранично-допустимих концентрацій цинку.

Корекція інтоксикацій, обумовлених важкими металами, вимагає
застосування препаратів, які характеризуються комплексним впливом на
організм. Сучасними засобами підвищення опірності та мобілізації
захисних систем організму, профілактики дисбактеріозу кишечнику,
порушень метаболізму є пробіотики – препарати, сконструйовані на основі
живих мікробних культур. Багатофакторність дії спороутворюючих бактерій
роду Bacillus, зокрема їх антитоксичні властивості, ферментативна та
антагоністична активність стосовно патогенних і умовно-патогенних
мікроорганізмів, здатність до корекції імунної відповіді, сорбції важких
металів і радіонуклідів у поєднанні з швидкою елімінацією із
шлунково-кишкового тракту, дозволяє розглядати пробіотики із бацил як
засоби, що сприяють виведенню важких металів з організму [Бакулина Л.Ф.
и др., 2001; Смирнов В. В., и др., 1993]. Саме тому науково-практичний
інтерес становить дослідження терапевтичного та профілактичного впливу
пробіотиків із бактерій роду Bacillus на організм лабораторних тварин за
умов цинкової інтоксикації.

Зв’язок роботи з науковими програмами, планами, темами. Дисертаційна
робота частково виконувалась у межах науково-дослідної роботи ДБ 433
кафедри біохімії та фармакології Ужгородського національного
університету „Вивчення впливу застосування деяких еубіотиків на стан
гіпофізарно-тиреоїдної системи макроорганізму” (№ держреєстрації
ДР-0100U005360), спільної українсько-угорської науково-дослідної роботи
„Вивчення мобілізації, акумуляції, поширення і біоремедіації важких
металів у забруднених екосистемах верхнього басейну ріки Тиса” (№
М/490-2003).

Мета і задачі дослідження. Метою роботи було встановити терапевтичну і
профілактичну ефективність пробіотиків із бактерій роду Bacillus
(Моноспорин-ПК та Біоспорин) стосовно порушень мікрофлори кишечнику,
імунного та метаболічного статусу організму лабораторних тварин за умов
експериментальної цинкової інтоксикації.

Для досягнення поставленої мети необхідно було вирішити наступні задачі:

1. Дослідити стан мікробіоценозу кишечнику лабораторних тварин при
інтоксикації цинком.

2. Встановити особливості змін біохімічного, імунного та тиреоїдного
статусу організму за умов експериментальної цинкової інтоксикації.

3. Вивчити ефективність застосування пробіотиків із бактерій роду
Bacillus (Моноспорин-ПК та Біоспорин) стосовно порушень мікробіоценозу
кишечнику, спричинених цинковою інтоксикацією.

4. З’ясувати дію пробіотиків Моноспорин-ПК та Біоспорин на показники
біохімічного статусу, імунної відповіді та функціональної активності
щитоподібної залози при експериментальній цинковій інтоксикації.

5. Вивчити дію пробіотиків стосовно змін мікробіоценозу кишечнику,
деяких показників імунного та метаболічного статусу організму в умовах
експериментального гіпотиреозу.

Об’єкт дослідження – бактеріальні препарати із бактерій роду Bacillus
Моноспорин-ПК та Біоспорин.

Предмет дослідження – показники мікробіоценозу кишечнику, метаболічного
та імунного статусу організму у лабораторних тварин при інтоксикації
цинком та в результаті корекції пробіотиками.

Методи дослідження – для виконання поставлених задач використовували
мікробіологічні, біохімічні та імунологічні методи дослідження.

Наукова новизна одержаних результатів. Вперше показано, що цинкове
отруєння спричинює зміни якісного та кількісного складу мікробіоценозу
кишечнику. Отримано нові дані стосовно особливостей порушень
біохімічного, тиреоїдного, імунного статусу організму при цинковій
інтоксикації. Виявлено кореляційну залежність змін деяких показників
імунного та тиреоїдного статусу організму при отруєнні цинком.

Вперше застосовано пробіотики із бактерій роду Bacillus Моноспорин-ПК та
Біоспорин з метою корекції порушень, спричинених цинковою інтоксикацією.
Виявлено ефективність застосування бактеріальних біопрепаратів стосовно
порушень мікробіоценозу кишечнику, деяких показників імунного та
біохімічного статусу організму, обумовлених інтоксикацією цинком.

Практичне значення одержаних результатів. Одержані експериментальні дані
характеризують порушення в організмі лабораторних тварин при
інтоксикації цинком. Встановлені зміни у складі мікрофлори кишечнику при
цинковій інтоксикації обґрунтовують необхідність застосування
бактеріальних препаратів для нормалізації мікробіоценозу в умовах
надмірного надходження солей цинку в організм.

Практична цінність даної роботи полягає у розширенні спектру
використання пробіотиків, сконструйованих на основі бактерій роду
Bacillus, зокрема для корекції порушень мікробіоценозу кишечнику,
імунного та метаболічного статусу організму в умовах цинкової
інтоксикації та гіпотиреозу. Корегуюча дія пробіотиків із бактерій роду
Bacillus (Моноспорин-ПК та Біоспорин) стосовно деяких виявлених при
інтоксикації цинком порушень мікрофлори кишечнику, метаболічного та
імунного статусу організму обґрунтовує можливість їх застосування у
практиці при цинкових отруєннях.

Особистий внесок здобувача. Робота виконана автором особисто на кафедрі
генетики, фізіології рослин і мікробіології.

Автором самостійно опрацьовано літературу за темою дисертації, особисто
проведена експериментальна робота, біохімічні та мікробіологічні
дослідження, статистичний аналіз одержаних результатів, оформлення
роботи. Здобувачем особисто визначено наслідки дії експериментальної
цинкової інтоксикації на мікробіоценоз кишечнику лабораторних тварин,
проведено ідентифікацію мікроорганізмів, вивчено ефективність
застосування бактерій роду Bacillus стосовно виявлених порушень у складі
нормальної мікрофлори кишечнику, імунного та метаболічного статусу
організму за умов експериментальної цинкової інтоксикації. Аналіз та
інтерпретацію результатів дослідження імунного та тиреоїдного статусу
організму проведено з співробітниками Ужгородського національного
університету, які є співавторами в опублікованих роботах.

Планування основних напрямків роботи та обговорення результатів
досліджень проходило за безпосередньої участі наукового керівника
доктора біологічних наук, професора Ніколайчука В.І.

Апробація результатів дисертації. Матеріали дисертації були представлені
на 57-й та 58-й підсумкових конференціях професорсько-викладацького
складу УжНУ; Міжнародній науковій конференції „Проблеми урбоекології,
урболандшафтознавства та фітомеліорації міського середовища” (Львів,
2003); Міжнародній конференції, присвяченій 120-річчю від дня народження
Р. Вейгля „Мікроорганізми у патогенезі та їхня стійкість до лікарських
препаратів” (Львів, 2003); VI Міжнародній науково-практичній конференції
студентів, аспірантів та молодих вчених „Екологія. Людина. Суспільство”
(Київ, 2003); III Міжнародній науково-практичній конференції „Динаміка
наукових досліджень” (Дніпропетровськ, 2004); ІІІ (Х) з’їзді Товариства
мікробіологів України (Одеса, 2004); Всеукраїнській науковій конференції
молодих учених „Сучасні проблеми фізіології рослин та біотехнології”
(Ужгород, 2005).

Публікації. За результатами дисертаційної роботи опубліковано 11
наукових праць, з них 6 – статті у фахових наукових виданнях та 5 – тези
доповідей.

Структура та обсяг дисертації. Дисертаційна робота складається з
наступних структурних частин: „Вступ”, „Огляд літератури”, „Матеріали та
методи досліджень”, „Результати досліджень”, „Обговорення результатів”,
„Висновки”, „Список використаних джерел”, до якого входить 207
найменувань. Робота містить 12 рисунків та 30 таблиць і викладена на 148
сторінках машинописного тексту.

ОСНОВНИЙ ЗМІСТ РОБОТИ

Огляд літератури

В розділі висвітлені властивості пробіотиків, сконструйованих на основі
бактерій роду Bacillus, охарактеризовано бактеріальні препарати
Моноспорин-ПК та Біоспорин. Наведено літературні дані стосовно
токсичного впливу сполук цинку на організм теплокровних та шляхи їх
антропогенного надходження у довкілля. Обґрунтовано доцільність вивчення
впливу бактеріальних препаратів із бактерій роду Bacillus на мікрофлору
кишечнику, імунний та метаболічний статус лабораторних тварин при
цинковій інтоксикації.

Матеріали та методи досліджень

Досліди проводили на лабораторних тваринах: 80 кролях, 70 морських
свинках та 72 мишах, яких утримували на звичайному раціоні віварію. Всі
роботи виконували у відповідності до „Загальних етичних принципів
експериментів на тваринах” [Перший національний конгрес з біоетики,
2001].

Контроль становила одна з восьми груп кролів – здорові тварини. Тварини
груп КМ (введення Моноспорину-ПК здоровим тваринам) та КБ (введення
Біоспорину здоровим тваринам) протягом 7 днів щоденно приймали по 1мл
біопрепарату Моноспорин-ПК та Біоспорин відповідно у дозі 109 мікробних
клітин на 1 тварину. Експериментальне отруєння у тварин відтворювали
шляхом перорального введення сульфату цинку з розрахунку 2 мг/кг 1 раз
на добу протягом 10 діб. Одна з груп становила контроль інтоксикації –
Zn(інтоксикація). Тваринам груп Zn+Моноспорин(терапія) та
Zn+Біоспорин(терапія), з метою дослідження дії пробіотиків на організм
при цинковій інтоксикації, після припинення введення сульфату цинку
застосовували біопрепарати Моноспорин-ПК та Біоспорин відповідно
протягом 7 діб у вищевказаній дозі. Дослідження профілактичної
ефективності проводили шляхом введення Моноспорину-ПК та Біоспорину
тваринам груп Моноспорин+Zn(профілактика) та Біоспорин+Zn(профілактика)
за тиждень до відтворення інтоксикації протягом 7 днів.

Кількісний та якісний склад мікрофлори кишечнику кролів, рівень
біохімічних показників сироватки крові, лейкограми, тиреоїдних гормонів
і досліджуваних імунних показників визначали в динаміці: у тварин групи
Zn(інтоксикація) – через 1 та 7 діб після припинення введення солі
цинку; Zn+Моноспорин(терапія) та Zn+Біоспорин(терапія) – через 1 та 7
діб після останнього введення пробіотику; Моноспорин+Zn(профілактика) та
Біоспорин+Zn(профілактика) – через 1 та 7 діб після останнього введення
сульфату цинку.

З метою з’ясування вірогідності встановлених закономірностей впливу
пробіотиків на організм різних лабораторних тварин в умовах цинкової
інтоксикації вивчали терапевтичну та профілактичну ефективність
пробіотику Моноспорин-ПК в дослідах на морських свинках.

Визначення терапевтичної ефективності біопрепарату Моноспорин-ПК
стосовно порушень мікрофлори кишечнику, деяких показників метаболічного
та імунного статусу організму, спричинених гіпотиреоїдним станом,
здійснювали шляхом введення пробіотику лабораторним тваринам на фоні
експериментального гіпотиреозу [Надольник Л.И. и др., 2000].

Вивчення впливу сульфату цинку на кількісний та якісний склад мікрофлори
кишечнику лабораторних тварин здійснювали шляхом проведення
бактеріологічного аналізу випорожнень. Враховували загальну кількість
Е.coli, бактерій родів Proteus, Staphylococcus, ентерококів,
дріжджоподібних грибів, гемолітичних форм стафілококу та кишкової
палички, відсоткове співвідношення лактозопозитивних та
лактозонегативних Е.coli, аеробних спороутворюючих бактерій, біфідо- та
лактобактерій. Ідентифікацію мікроорганізмів проводили з врахуванням
морфологічних, культуральних та біохімічних властивостей бактерій
[Краткий определитель бактерий, 1980].

Про стан імунної системи судили за рівнем імуноглобулінів (IgA, IgM,
IgG), середніх та малих циркулюючих імунних комплексів у сироватці
крові. Рівень імуноглобулінів визначали методом радіальної імунодифузії
за Манчіні [Злотник Т.Е. и др., 1990]. Циркулюючі імунні комплекси в
сироватці крові виявляли методом преципітації поліетиленгліколем
[Иммунологические методы, 1987]. Відсоткове співвідношення різних видів
лейкоцитів периферійної крові кролів вивчали шляхом підрахунку
лейкоцитарної формули [Руководство…, 1987].

Для оцінки впливу солі цинку та пробіотиків (Моноспорин-ПК і Біоспорин)
на показники біохімічного статусу організму у сироватці крові
лабораторних тварин визначали: вміст білкових фракцій (альбуміни, (1-,
(2-, (-, (-глобуліни) – методом електрофорезу на папері; концентрацію
сечовини – за реакцією з диацетилмонооксимом; глюкози – за допомогою
глюкозооксидазного методу; холестерину – методом Ілька; тимолової проби
– шляхом осадження патологічно підвищених концентрацій (-глобулінів, (-
глобулінів і ліпопротеїнів із сироватки крові буферним розчином
(pH=7,55), насиченим тимолом, із наступним вимірюванням інтенсивності
каламутності сироватки [Колб В.Г. и др., 1982]. У сироватці крові та
печінці мишей визначали вміст малонового диальдегіду за його здатністю
утворювати забарвлений комплекс при взаємодії з тіобарбітуровою кислотою
[„Методичні рекомендації…”, 1999]. Каталазу у сироватці та печінці
визначали спектрофотометричним методом за інтенсивністю забарвленого
комплексу, що утворюється при взаємодії перекису водню з молібдатом
амонію [Корлюк М. А. и др., 1988].

Тиреоїдний стан організму оцінювали за рівнем тиреоїдних гормонів у
сироватці крові – загального тироксину (Т4) та трийодтироніну (Т3).
Концентрацію гормонів визначали шляхом імуноферментного аналізу,
використовуючи тест-системи “Хема-Медика” (Росія).

Результати досліджень піддавали статистичному аналізу з використанням
t-критерію Стьюдента [Лакин Г.Ф., 1990]. Зміни вважали достовірними при
рТаблиця 2 Терапевтична ефективність пробіотиків стосовно порушень мікробіоценозу кишечнику кролів за умов експериментальної цинкової інтоксикації, (М±m) Група мікроорганізмів Кількість КУО в 1 г випорожнень Zn+Моноспорин(терапія) Zn+Біоспорин(терапія) доба після останнього введення пробіотику 1 7 1 7 Escherichia coli: загальна кількість (2,53±0,17)Ч105*** (4,63±0,12)Ч105** (2,80±0,13)Ч105*** (4,75±0,07)Ч105** лактозопозитивні (2,30±0,13)Ч105*** (4,28±0,18)Ч105** (2,56±0,07)Ч105*** (4,41±0,07)Ч105** лактозонегативні (% від загальної кількості) 9 % 7,5 % 8,7 % 7,1 % гемолітичні 0 0 0 0 Бактерії роду Staphylococcus (3,68±0,15)Ч103*** (2,24±0,24)Ч103** (3,50±0,06)Ч103*** (2,09±0,08)Ч103** гемолітичні 0 0 0 0 Дріжджоподібні гриби (4,72±0,16)Ч104*** (1,80±0,09)Ч104** (2,13±0,09)Ч104*** (1,69±0,09)Ч104** Ентерокок (5,11±0,22)Ч102* (6,76±0,21)Ч102** (5,48±0,06)Ч102* (6,84±0,11)Ч102** Бактерії роду Proteus 102** 102** 102** 102** Аеробні спороутворюючі бактерії (9,45±0,26)Ч106*** (8,43±0,21)Ч105*** (9,04±0,16)Ч106*** (8,10±0,25)Ч105*** Біфідобактерії 107-108*** 108-1010** 107-108*** 108-1010** Лактобактерії 107-108*** 108-109** 107-108*** 108-109** Примітка: * - зміни показників достовірні у порівнянні з тваринами групи „Контроль”; ** - стосовно показників у тварин групи Zn (інтоксикація) через 1 добу після останнього введення сульфату цинку; *** - по відношенню до тварин обох зазначених груп, (рТаблиця 3 Профілактична ефективність пробіотиків стосовно порушень мікробіоценозу кишечнику кролів за умов експериментальної цинкової інтоксикації, (М±m) Група мікроорганізмів Кількість КУО в 1 г випорожнень Моноспорин+Zn(профілактика) Біоспорин+Zn(профілактика) доба після останнього введення сульфату цинку 1 7 1 7 Escherichia coli загальна кількість (1,80±0,12)Ч105*** (3,79±0,14)Ч105*** (2,10±0,09)Ч105*** (4,08±0,08)Ч105** лактозопозитивні (1,64±0,16)Ч105*** (3,49±0,17)Ч105*** (1,91±0,07)Ч105*** (3,76±0,08)Ч105*** лактозонегативні (% від загальної кількості) 9 % 8 % 8,8 % 7,8 % гемолітичні 0 0 0 0 Бактерії роду Staphylococcus (3,94±0,15)Ч103*** (3,13±0,16)Ч103** (3,66±0,05)Ч103*** (2,93±0,07)Ч103** гемолітичні 0 0 0 0 Дріжджоподібні гриби (7,41±0,16)Ч104*** (2,53±0,14)Ч104** (2,65±0,07)Ч104*** (1,84±0,08)Ч104** Ентерокок (6,21±0,19)Ч102** (7,20±0,20)Ч102** (6,29±0,06)Ч102** (7,06±0,07)Ч102** Бактерії роду Proteus 102** 102** 102** 102** Аеробні спороутворюючі бактерії (1,21±0,12)Ч105*** (8,90±0,32)Ч104** (1,89±0,06)Ч105*** (9,15±0,18)Ч104** Біфідобактерії 107-108*** 108-1010** 107-108*** 108-1010** Лактобактерії 107-108*** 108-109** 107-108*** 108-109** Примітка: * - зміни показників достовірні у порівнянні з тваринами групи „Контроль”; ** - стосовно показників у тварин групи Zn (інтоксикація) через 1 добу після останнього введення сульфату цинку; *** - по відношенню до тварин обох зазначених груп, (рВ умовах експериментальної цинкової інтоксикації представляло інтерес дослідити характер розвитку імунологічних змін, оскільки саме імунна відповідь обумовлює підтримку гомеостатичного балансу організму [Сепиашвили Р.И., 2003] та відіграє значну роль у регуляції чисельності нормальної мікрофлори [Бондаренко В.М. и др., 2004]. - 2 4 6 $JAuAE e ????$? ??? - 6 d "$’AuJ AE „@ ^„@ „@ „Ao^„@ „@ ^„@ ;l??IB?E†HiLOM*T?Uf\’]?`?`¶`iiaaaaaaaaOOEOOOEOOO1/21/2

?kd*

?kdy

?F?issOAEAETAEAEAEqkd·

??

????l?Ѓ??

¦

¦

¦

¦

¦

¦

¦

¦

¦

¦

¦

¦

¦

¦

ної активності гуморальної ланки імунітету, зокрема її В-підсистеми,
показало, що в результаті 10-денного введення кролям сульфату цинку
концентрація IgМ, IgG та IgА змінювалась. У сироватці крові отруєних
тварин спостерігали зниження кількості IgG у 1,5 рази (рис. 1).

Рис. 1 Терапевтична та профілактична ефективність пробіотиків
Моноспорин-ПК та Біоспорин стосовно рівня IgG при експериментальній
цинковій інтоксикації:

1 – Контроль (здорові тварини); 2 – Zn(інтоксикація); 3 –
Zn+Моноспорин(терапія); 4 – Zn+Біоспорин(терапія); 5 –
Моноспорин+Zn(профілактика); 6 – Біоспорин+Zn(профілактика).

Зниження рівня IgG може супроводжувати гострі та хронічні захворювання
печінки, що часто відмічається у жителів регіонів, об’єкти навколишнього
середовища яких характеризуються високим вмістом важких металів
[Назаренко Г.И. и др., 2000; Уланова Л. Н. и др., 1995]. Особливо
суттєвими, у порівнянні з контрольними показниками (0,06(0,01 МО/мл),
були зміни кількості IgM, що зростала більше ніж у 8 разів і коливалась
в межах 0,50(0,09 МО/мл (рис. 2). Підвищення рівня IgM на фоні
гіпогамаглобулінемії в умовах інтоксикації може бути обумовлене
зниженням інтенсивності деструкції імуноглобулінів класу М в отруєному
організмі [Клиническая иммунология…, 1986]. Рівень IgА сироватки крові
після 10-денного введення сульфату цинку не змінювався і становив
1,20(0,09 МО/мл (1,44(0,14 МО/мл у конторолі). Однак через 7 діб після
припинення введення сульфату цинку спостерігали статистично достовірну
тенденцію до зниження вмісту IgА (1,10(0,03 МО/мл), в той же час
концентрація IgG та IgM не змінювалась і становила 5,52(0,15 МО/мл та
0,47(0,01 МО/мл відповідно. Виявлені зміни концентрації імуноглобулінів
при отруєнні цинком згідно даних літератури відносяться до
„варіабельного типу” дефіциту імуноглобулінів: зниження рівня IgG при
одночасно високій концентрації IgМ. При цьому вміст IgА може не суттєво
знижуватись або відповідати нормі. Даний тип імунодефіциту
характеризується зниженням резистентності організму до інфекційних
захворювань [Клиническая иммунология…, 1986].

Рис. 2 Терапевтична та профілактична ефективність пробіотиків
Моноспорин-ПК та Біоспорин стосовно рівня IgМ при експериментальній
цинковій інтоксикації:

1 – Контроль (здорові тварини); 2 – Zn(інтоксикація); 3 –
Zn+Моноспорин(терапія); 4 – Zn+Біоспорин(терапія); 5 –
Моноспорин+Zn(профілактика); 6 – Біоспорин+Zn(профілактика).

Застосування пробіотиків Моноспорин-ПК та Біоспорин за умов
експериментальної цинкової інтоксикації супроводжувалось нормалізацією
рівня IgG (рис. 1) та корекцією (зниженням) IgM (рис. 2). Вміст IgA не
виходив за межі норми і становив 1,34(0,12 МО/мл при терапевтичному
застосуванні Моноспорину-ПК та 1,38(0,01 МО/мл – Біоспорину.

Через 7 діб після останнього терапевтичного введення пробіотиків
спостерігали статистично достовірне зниження рівня IgM до 0,18(0,01
МО/мл за умов застосування Моноспорину-ПК і 0,15(0,01 МО/мл –
Біоспорину. Вміст IgG та IgA у сироватці крові після припинення введення
пробіотиків залишався в межах норми: у групі тварин
Zn+Моноспорин(терапія) рівень IgG становив 8,79(0,16 МО/мл, IgA –
1,36(0,03 МО/мл; Zn+Біоспорин(терапія) – 8,85(0,09 МО/мл та 1,34(0,01
МО/мл відповідно.

Застосування пробіотиків з профілактичною метою попереджало зниження
концентрації IgG: у групі Моноспорин+Zn(профілактика) рівень IgG
становив 9,05±0,26 МО/мл, Біоспорин+Zn(профілактика) – 9,10±0,07 МО/мл.
Введення Біоспорину до відтворення інтоксикації сприяло також менш
різкому зростанню концентрації IgМ. Рівень IgМ у групі
Моноспорин-ПК+Zn(профілактика) утримувався на патологічно високому
рівні, достовірно не відрізняючись від групи отруєних тварин. Вміст IgА
у сироватці крові лабораторних тварин при профілактичному введенні
пробіотиків не виходив за межі норми і становив 1,12±0,08 МО/мл при
введенні Моноспорину-ПК та 1,26±0,01 МО/мл – Біоспорину.

Через 7 діб після припинення введення сульфату цинку у групі
профілактичного застосування пробіотиків спостерігали тенденцію до
зниження рівня IgМ (0,38±0,02 МО/мл) за умов введення Моноспорину-ПК та
0,27±0,01 МО/мл – Біоспорину; концентрація IgА не виходила за межі норми
і становила 1,22(0,02 МО/мл у групі Моноспорин+Zn(профілактика) та
1,27(0,01 МО/мл – Біоспорин+Zn(профілактика).

Отже, в умовах експериментальної цинкової інтоксикації виявлена
корегуюча дія пробіотиків Моноспорин-ПК та Біоспорин стосовно рівня IgG,
IgА та IgM сироватки крові.

Виявлено ефективність застосування пробіотиків із бактерій роду
Bacillus стосовно змін відсоткового співвідношення лейкоцитів крові
лабораторних тварин за умов цинкової інтоксикації.

Порушення показників лейкограми при інтоксикації цинком
характеризувались зростанням кількості моноцитів, еозинофілів, як
сегментоядерних, так і паличкоядерних нейтрофілів, зниженням відсотку
лімфоцитів (табл. 4).

Таблиця 4

Показники лейкоцитарної формули крові кролів

за умов експериментальної цинкової інтоксикації, (M±m)

Показник,

% Варіант досліду

Контроль

(здорові тварини) Zn (інтоксикація)

доба після останнього введення сульфату цинку

1 7

Моноцити 3,13±0,23 14,63±0,38* 7,13±0,23***

Лімфоцити 73,88±0,64 42,63±0,91* 54,75±0,67***

Еозинофіли 2,13±0,23 5,38±0,32* 9,25±0,25***

Нейтрофіли паличкоядерні 7,50±0,33 11,88±0,30* 8,25±0,31**

Нейтрофіли сегментоядерні 41,25±0,37 47,00±0,46* 32,63±0,71***

Примітка: * – зміни показників достовірні у порівнянні з тваринами групи
„Контроль”; ** – стосовно показників у тварин групи Zn (інтоксикація)
через 1 добу після останнього введення сульфату цинку; *** – по
відношенню до тварин обох зазначених груп, (р

Нашли опечатку? Выделите и нажмите CTRL+Enter

Похожие документы
Обсуждение

Ответить

Курсовые, Дипломы, Рефераты на заказ в кратчайшие сроки
Заказать реферат!
UkrReferat.com. Всі права захищені. 2000-2020