.

Механізми порушень гуморальних систем за умов дії іонізуючого випромінювання (автореферат)

Язык: украинский
Формат: реферат
Тип документа: Word Doc
110 2391
Скачать документ

Міністерство охорони здоров’я України

Луганський державний медичний університет

Пальона Юлія Володимирівна

УДК 612.014.48:577.15+57.081

Механізми порушень гуморальних систем за умов дії іонізуючого
випромінювання

14.03.04 – патологічна фізіологія

Автореферат

дисертації на здобуття наукового ступеня

кандидата біологічних наук

Луганськ-2007

Дисертацією є рукопис

Робота виконана в Кримському державному медичному університеті ім. С.І.
Георгієвського МОЗ України (м. Сімферополь)

Науковий керівник: доктор медичних наук, професор Харченко Володимир
Захарович, Кримський державний медичний університет ім. С.І.
Георгієвського МОЗ України, завідувач кафедри патологічної фізіології

Офіційні опоненти:

доктор медичних наук, професор Непорада Каріне Степанівна, Українська
медична стоматологічна академія (м. Полтава) МОЗ України, завідувач
кафедри біоорганічної та біологічної хімії

доктор біологічних наук, доцент Смірнов Сергій Миколайович, Луганський
державний медичний університет МОЗ України, професор кафедри медичної
біології

Провідна установа: Кафедра загальної та клінічної патологічної
фізіології ім. В.В. Підвисоцького, Одеський державний медичний
університет МОЗ України, м. Одеса

Захист відбудеться 13.04.2007 р. об 11.00 годині на засіданні
спеціалізованої вченої ради Д29.600.02 при Луганському державному
медичному університеті (91045, м. Луганськ, кв. 50-річчя Оборони
Луганська, 1)

З дисертацією можна ознайомитись в бібліотеці Луганського державного
медичного університету (91045, м. Луганськ, кв. 50-річчя Оборони
Луганська, 1)

Автореферат розісланий 05.03. 2007 р.

Вчений секретар

спеціалізованої вченої ради, доцент В.М.
Шанько

ЗАГАЛЬНА ХАРАКТЕРИСТИКА РОБОТИ

Актуальність теми. Розвиток сучасної променевої терапії базується на
постійному поглибленні знань не тільки з етіології і патогенезу
злоякісних новоутворень, клінічного перебігу захворювань, але й на
оцінці реакцій пухлинних і нормальних тканин організму на різні види
іонізуючих випромінювань (Акимов А.А., 2003; Ferrer І., 1999;
Zhіvotovsky B., 1999). В даний час загальне опромінення хворих широко
використовують при лікуванні гемобластозів, зокрема онкологічних
захворювань лімфатичної системи, що за частотою виникнення у дітей
займають друге місце серед усіх пухлин, а також при трансплантації
кісткового мозку (Удатова Т.В., 2001; Гранов А.М., 2002; Важенін А.В.,
2003; Канаев С.В., 2004; Yan R., 1991).

Особливого значення набуває виявлення метаболічно важливих показників,
визначення яких дозволяє представити зміни всієї системи клітинного
метаболізму, за умов радіоактивного техногенного забруднення, променевої
терапії (Удатова Т.В., 2001; Чорна В.І., 2001). Одним з таких
перспективних напрямків є дослідження клітинних і сироваткових протеїназ
та їх інгібіторів, антиоксидантної системи (АОС) і рівня ендогенної
інтоксикації (ЕІ) (Кубышкин А.В., 1994; Ліхолат О.А., 2000; Марченко
М.М., 2006; Hallіwell B., 1990).

Методи комплексного лікування онкологічних захворювань включають також
низькоінтенсивні електромагнітні випромінювання надвисокої частоти (ЕМВ
НВЧ) як фактор, що сприяє зниженню токсичної і підвищенню протипухлинної
дії хіміо- і променевої терапії, а також для профілактики
післяопераційних ускладнень, рецидивів, метастазів (Резункова О.П.,
2005; Чуян Е.Н., 2005; Badzhіnіan S.A., 2002; Ogaі V.B., 2003; Makar
V.R., 2005).

Таким чином, вивчення змін у системі протеолітичних ферментів та їх
інгібіторів, АОС і ЕІ при одноразовому впливі тотального
гамма-випромінювання на метаболічні процеси в різних тканинах організму
тварин дозволить з’ясувати основні механізми дії фактора, який ушкоджує,
і експериментально обґрунтувати нові шляхи корекції пошкоджень організму
за допомогою електромагнітного випромінювання надвисокої частоти (ЕМВ
НВЧ).

Зв’язок роботи з науковими програмами, планами, темами. Робота виконана
в рамках наукової тематики кафедри патофізіології Кримського державного
університету ім. С.І. Георгієвського “Патофізіологія, імунохімія,
цитохімія ферментопатій при екстремальних станах” (номер державної
реєстрації 0197U014234) і “Протеоліз і вільнорадикальне окиснення
ліпідів в патогенезі екстремальних станів” (номер державної реєстрації
0101U006553). Шифр теми 2.223.

Мета роботи: встановити роль протеолітичних ферментів та їх інгібіторів,
компонентів системи АОС і середньомолекулярних олігопептидів (СМО) у
механізмах дії на організм щурів одноразового тотального іонізуючого
випромінювання в дозі 6 Гр і експериментально обґрунтувати нові підходи
до їх корекції.

Для досягнення мети були поставлені наступні задачі:

Вивчити характер змін трипсиноподібної (ТПА) та еластазоподібної
активності (ЕПА), альфа-1-інгібітора протеїназ (?-1-ІП) у сироватці
крові щурів при дії одноразового тотального гамма-випромінювання у дозі
6 Гр.

Вивчити в експерименті ступінь змін компонентів АОС: супероксиддисмутази
(СОД), каталази та пероксидази під впливом одноразового тотального
гамма-випромінювання у дозі 6 Гр у сироватці крові щурів.

Вивчити вплив іонізуючого випромінювання у дозі 6 Гр на стан
протеїназ-інгібіторної системи в бронхоальвеолярному змиві, тканинах
тонких кишок та великих півкуль головного мозку щурів.

Виявити зміни активності СОД, каталази та пероксидази у
бронхоальвеолярному змиві, тканинах тонких кишок та великих півкуль
головного мозку в умовах дії одноразового тотального
гамма-випромінювання у дозі 6 Гр.

Вивчити динаміку зміни концентрації СМО у сироватці крові,
бронхоальвеолярному змиві, тканинах тонких кишок та великих півкуль
головного мозку при дії одноразового тотального гамма-випромінювання у
дозі 6 Гр.

Оцінити ефективність превентивного застосування ЕМВ НВЧ як фактора, що
зменшує пошкодження від дії іонізуючого випромінювання на організм
щурів.

Об’єкт дослідження – щури, піддані впливу гамма-випромінювання, ЕМВ НВЧ
та їх комбінації.

Предмет дослідження – стан протеїназ-інгібіторної системи, АОС та рівня
СМО при дії гамма-випромінювання, ЕМВ НВЧ, їх комбінації та
обгрунтування патогенетичної корекції патологічних змін, що
розвиваються.

Методи дослідження – біохімічні: визначення ТПА та ЕПА, рівня ?-1-?П,
антитриптичної активності (АТА), активності СОД, каталази, пероксидази,
концентрації СМО та статистичні методи дослідження.

Наукова новизна отриманих результатів. Наукова новизна полягає в
експериментальному обгрунтуванні патогенетичної значимості порушень в
протеолітичній системі та АОС, рівні ЕІ при дії іонізуючого
випромінювання та немедикаментозної їх корекції за допомогою ЕМВ НВЧ.
Уперше, у результаті комплексного вивчення динаміки змін у сироватці
крові, бронхоальвеолярному змиві, тканинах тонких кишок і великих
півкуль головного мозку виявлені нові механізми, які пояснюють дію
іонізуючого випромінювання на організм тварин. Уперше встановлені
взаємозалежні порушення в системах протеолізу, антиоксидантного захисту,
збільшення рівня ЕІ. Встановлено, що дисбаланс протеїназ-інгібіторної
системи та АОС виникає не тільки в сироватці крові, але й у
бронхоальвеолярному змиві, тканинах тонкої кишки і великих півкуль
головного мозку. Розроблений принципово новий спосіб визначення тяжкості
пошкоджень організму та новий підхід до патогенетичної корекції змін, що
відбуваються в організмі при впливі гамма-випромінювання, що включає
застосування ЕМВ НВЧ.

Практичне значення отриманих результатів. В результаті проведених
експериментальних досліджень одержані дані, які при дії
гамма-випромінювання можуть служити підставою для рекомендацій щодо
клінічного використання способу оцінки ступеня пошкодження організму та
способу немедикаментозної корекції порушень у системі протеолітичних
ферментів та їх інгібіторів за допомогою ЕМВ НВЧ.

Матеріали роботи використані в навчальному процесі кафедр патофізіології
Кримського державного медичного університету ім. С.І. Георгієвського,
Харківського державного медичного університету, Сумського державного
університету, Буковинського державного медичного університету,
Донецького державного медичного університету ім. М. Горького,
Івано-Франківського державного медичного університету; кафедри
променевої діагностики та променевої терапії Кримського державного
медичного університету ім. С.І. Георгієвського, а також в радіологічному
відділенні КРУ “Клінічна лікарня ім. М.О. Семашка” м. Сімферополя.

Особистий внесок здобувача. Авторкою самостійно проведено
патентно-інформаційний пошук, аналіз актуальності і ступеня вивчення
проблеми, визначені напрямки досліджень, мета і задачі роботи, огляд і
аналіз літератури, визначені методологічні підходи, відпрацьовані
моделі, у відповідності з якими особисто проведені експериментальні
дослідження, вивчені та узагальнені результати проведених досліджень,
обгрунтовані наукові висновки і рекомендації для практичного
використання одержаних результатів. Розроблено спосіб оцінки ступеня
пошкодження організму та спосіб немедикаментозної корекції порушень у
системі протеолітичних ферментів та їх інгібіторів за допомогою ЕМВ НВЧ
при дії гамма-опромінення (деклараційні патенти України на корисну
модель № 17295 (А61В 5/145) від 15.09.2006 р. та № 15402 (А61К 35/02)
від 15.06.2006 р.).

Апробація результатів. Результати досліджень повідомлені на: V
Всеукраїнській науковій конференції студентів і аспірантів (Київ, 2005
р.), 76-й науково-практичній конференції молодих вчених (Сімферополь,
2005 р.), наукових конференціях “ІV і V-і читання ім. В.В.
Підвисоцького”, (Одеса, 2005-06 р.), VI з’їзді Українського біофізичного
товариства (Донецьк, 2006 р.), ІX Міжнародній науково-практичній
конференції “Наука та освіта 2006” (Дніпропетровськ, 2006 р.), 2-й
міжнародній науковій конференції студентів і аспірантів “Молодь та
поступ біології” (Львів, 2006), Міжнародній науково-практичній
конференції “Актуальні питання клінічної і військово-морської медицини.
Досягнення і перспективи” (Севастополь, 2006 р.), І Міжнародній
науково-практичній конференції “Наука і технології: крок у
майбутнє-2006” (Бєлгород, 2006 р.), міжнародній конференції “Механізми
функціонування фізіологічних систем” (Львів, 2006 р.), Міжнародній
науковій конференції “Механізми функціонування фізіологічних систем”
(Львів, 2006), науково-практичній конференції “Актуальні питання
патофізіології” (Сімферополь, 2006 р.), конференції
“Еколого-фізіологічні проблеми адаптації” (Партеніт, 2006 р.).

Публікації. За матеріалами дисертації опубліковано 16 наукових праць, з
них 5 – статті в затверджених ВАК України журналах і збірниках, 3 з
котрих – одноосібні, 2 – в співавторстві, 11 – в матеріалах і тезах
з’їздів, симпозіумів, наукових конференцій. Одержані 2 деклараційних
патенти України на корисну модель.

Обсяг і структура дисертації. Дисертаційна робота складається зі вступу,
огляду літератури, матеріалів і методів дослідження, розділу власних
досліджень, розділу аналізу та узагальнення результатів, висновків,
практичних рекомендацій, списку використаних джерел. Бібліографічний
перелік містить 285 найменувань, із них 173 кирилицею і 112 латиницею.
Текст викладено на 170 сторінках, ілюстровано 12 таблицями, 25
графіками.

ОСНОВНИЙ ЗМІСТ РОБОТИ

Матеріал і методи дослідження. Експериментальні дослідження проведені на
116 білих щурах-самцях лінії Вістар масою 180-200 г. Експериментальну
дію іонізуючого випромінювання здійснювали шляхом впливу на тварин
одноразового тотального опромінення з використанням гамма-кобальтової
гармати “АГАТ-Р1” (60Со) за наступних умов: осередкова доза 6 Гр, поле
20х20 см, відстань до предмету = 75 см, РІК=90 см, глибина = 3 см (89,6
%), Р=1,155 сГр/с, тривалість експозиції 580 с. Під час дій гамма- та
ЕМВ НВЧ тварини знаходились у виготовлених клітках-фіксаторах з
органічного скла з отворами для вільного надходження повітря (Кузьменко
І.А., 2004). Вплив низькоінтенсивного ЕМВ НВЧ проводили за допомогою
терапевтичного генератора “КВЧ. РАМЕД-ЭКСПЕРТ – 01” з довжиною хвилі 7,1
мм (частота випромінювання – 42,3 ГГЦ) і щільністю потоку потужності 0,1
мвт/кв. см, виготовленого Центром радіофізичних методів діагностики і
терапії “РАМЕД” Інституту технічної механіки НАНУ, м. Дніпропетровськ
(реєстраційне свідчення № 783/99 від 14.07.99, видане КНМТ МОЗ України
про право на застосування в медичній практиці в Україні). Вплив
здійснювався по 30 хвилин на потилично-комірцеву ділянку протягом 9 днів
експерименту (Чуян Е.Н., 2005).

Кров для досліджень у щурів отримували шляхом декапітації під легким
ефірним наркозом, потім одержували бронхоальвеолярний змив (БАЗ) шляхом
шестиразового промивання легень 10 мл фізіологічного розчину (Кубышкин
А.В., 1994), гомогенати тканин слизової оболонки тонкої кишки і великих
півкуль головного мозку одержували при механічній гомогенізації (Барабой
В.А., 1994) з використанням 0,05 М трис-Нсl буфера, рн 7,4.

Для проведення експериментального дослідження лабораторні тварини були
розділені на 4 групи: 1 – контрольна група щурів, що знаходились у
звичайних умовах віварію – 32 тварини; 2 – щури, піддані дії тотального
одноразового іонізуючого випромінювання в дозі 6 Гр з декапітацією через
24 години, 3, 7, 14 і 30 днів після впливу, відповідно – 60 тварини; 3 –
щури, піддані ізольованому впливу ЕМВ НВЧ – 12 тварин; 4 – щури, піддані
послідовній дії спочатку ЕМВ НВЧ протягом 9 днів, а потім іонізуючого
випромінювання з наступною декапітацією через 3 дні після дії
гамма-випромінювання – 12 тварин.

Трипсиноподібну активність плазми крові, БАЗ та супернатантів
гомогенатів тканин вимірювали спектрофотометричним методом (А.В.
Кринская та співавт., 1977). Вимір еластазоподібної активності проводили
за гідролізом синтетичного субстрату N-t-BOC-аланіл-p-нітрофінілового
ефіру (Reanal) (О.Г. Оглоблина та співавт., 1980). Визначення рівня
альфа-1-ІП у сироватці крові та АТА в супернатантах гомогенатів тканин
та бронхоальвеолярному змиві проводили уніфікованим методом В.Ф.
Нартикової і Т.С. Пасхіної (1977). Визначення антиокислювального
потенціалу включало дослідження активності пероксидази, каталази (Т.
Попов та співавт., 1971; М.А. Королюк та співавт., 1988) та СОД (С.
Чевари та співавт., 1985). Рівень СМО визначали за методикою Н.І.
Габрієлян та співавт., 1981; концентрацію загального білка за методом
Лоурі (Lowry O.H., 1951). Статистична обробка одержаних цифрових даних
проведена з використанням методів варіаційної статистики з обчисленням
середніх величин (M), їх похибки (m), вірогідними вважали показники при
рLxz?uuez ae ae z | ¤ ??????????????????????z ¤ a P "ae%`)¶+",E-ooooeeeeeaOIIOA??c & ???????¤?????ких півкуль головного мозку також різко зменшувалась активність антиоксидантних ферментів. У тканинах тонких кишок знижувалась тільки активність СОД і каталази, а ППА досягала максимальних значень, що на 421 % перевищували контрольні (p

Нашли опечатку? Выделите и нажмите CTRL+Enter

Похожие документы
Обсуждение

Ответить

Курсовые, Дипломы, Рефераты на заказ в кратчайшие сроки
Заказать реферат!
UkrReferat.com. Всі права захищені. 2000-2020