3
IAOeIIIAEUeIA AEAAeAIIss IAOE OE?A?IE
IINOEOOO EEIOEIII? AIIEIAI? I AAIAOE*II? IIAEAIA?I?
IAAeAAAe?AA Oaia?a Aaneeiaia
OAeE 577.21+582.951.4
IO?EIAIIss O?AINAAIIEO ?INEEI OTHOTHIO OA EA?OIIEI C EI?AIANIAOeEOI*IITH
OA AOEUeAINIAOeEOI*IITH AENI?ANI?TH OEIA?IEO AAIIA
03.00.15 — aaiaoeea
A a o i ? a o a ? a o
aeena?oaoei? ia caeiaoooy iaoeiaiai nooiaiy
eaiaeeaeaoa aiieiai/ieo iaoe
E e ? a — 1 9 9 8
Aeena?oaoei?th ? ?oeiien
?iaioa aeeiiaia o aiaeaeiei aiiiiaeaia?i? Iinoeoooo aiii?aaii/ii? oiii?
oa iaooioiii? IAI Oe?a?ie oa o aiaeaeiei iieaeoey?ii? aiieiai? Iinoeoooo
ii.Ianoa?a, Oaaa?ai, I?ai
Iaoeiaee ea?iaiee: aeieoi? aiieiai/ieo iaoe
Aaeeii Aiaoieie Iaaeiae/,
Iinoeooo aiii?aaii/ii? oiii? oa iaooioiii?
IAI Oe?a?ie, caaiaeoaa/ aiaeaeieii
Ioioeieii iiiiaioe: aeieoi? aiieiai/ieo iaoe
Eaaaiei Ai?en Ieaenieiae/,
Iinoeooo oiciieiai? ?ineei ? aaiaoeee
IAI Oe?a?ie, caaiaeoaa/ aiaeaeieii;
eaiaeeaeao aiieiai/ieo iaoe
Eo/oe Ieeiea Aieoi?iae/,
Iinoeooo eeioeiii? aiieiai? ? aaiaoe/ii? iiaeaia?i? IAI Oe?a?ie, noa?oee
iaoeiaee niia?iaioiee
I?iaiaeia i?aaiicaoeiy: Ee?anueeee oiiaa?neoao iiai? Oa?ana Oaa/aiea
Caoeno aeena?oaoei? aiaeaoaeaoueny 21 n?/iy 1999 ?ieo i 14.00 ia
caniaeaiii niaoeiaeiciaaii? a/aii? ?aaee Ae.26.202.01 ii caoenoo
aeena?oaoeie ia caeiaoooy iaoeiaiai nooiaiy eaiaeeaeaoa iaoe i?e
Iinoeoooi eeioeiii? aiieiai? i aaiaoe/ii? iiaeaia?i? IAI Oe?a?ie ca
aae?anith: 252143, Ee?a-143, aoe. aeaae.Caaieioiiai, 148.
C aeena?oaoei?th iiaeia iciaeiieoenue o aiaeiioaoei Iinoeoooo eeioeiii?
aiieiai? i aaiaoe/ii? iiaeaia?i? IAI Oe?a?ie.
Aaoi?aoa?ao ?icineaiee 9 a?oaeiy 1998 ?.
A/aiee nae?aoa? niaoeiaeiciaaii? ?aaee
Oa?anaiei E.A.
Caaaeueia oa?aeoa?enoeea ?iaioe
Aeooaeueiinoue oaie.
Ao?oeeaee ?icaeoie aaiaoe/ii? oa eeioeiii? iiaeaia?i? ?ineei i?eaia aei
cia/ieo oniioia a ?icoiiiii i?ioeania, ui aiaeaoaathoueny a ?ineeiiie
eeioeii, o aea/aiii aeni?ani? ?ineeiieo aaiia, i, ye ianeiaeie, aei
aaeeeiai i?ia?ano a aaiaoe/iiio eiino?othaaiii ?ineei c caaeaieie
aeanoeainoyie (Eo/oe,1997, Eaaaiei,1998).
?ic?iaea aoaeoeaieo iaoiaeia o?ainoi?iaoei? nieuenueeiainiiaea?nueeeo
aeaeia ?ineei noaiiaeoue aaeeeee iioa?an aeey aiioaoiieiai?, aa?ioiii?,
oa?iaoeaaoe/ii? oa ianiii?ai? iiaeono?i?. Oei iaoiaee aeathoue
iiaeeeainoue iieiioaiiy nieuenueeiainiiaea?nueeeo ?ineei, iaaeath/e ?i
oaei oeiiii yeinoi, ye noieeinoue aei aa?aioeeaeia, eiiao-oeiaeieeia,
ai?onieo caoai?thaaiue, iani?eyoeeaeo oaeoi?ia iaaeieeoiueiai
na?aaeiaeua (Tacke et al.,1996, Sano et al.,1997). O?ainaaiii ?ineeie —
i?eaaaeeaa i aoaeoeaia a oeiiiaiio aiaeiioaiii aeueoa?iaoeaa
iie?iaiieiai/iei nenoaiai aeey i?iaeoeoei? aiiiieaeoe. Oniioe a
aiioaoiieiai? aeathoue iiaeeeainoue aeei?enoiaoaaoe ?ineeie ye i?e?iaeii
aii?aaeoi?e aeey i?iaeoeoei? i iaaei?iaeoeoei? ?ineeiieo iaoaaieioia,
aaoa?ieiai/ieo i?ioa?iia c i?iieneiaith oa oa?iaoeaaoe/iith oeiiiinoth
(Goddijn et al.,1995, Mason et al.,1995).
Aeey iiaeaeueoiai ?icaeoeo ye ooiaeaiaioaeueieo, oae i i?eeeaaeieo ?iaio
ii aiioaoiieiai? aaaeeeaith oiiaith ? iayaiinoue iaiaoiaeiiai iaai?o
?aaoeyoi?ieo iaeanoae aaiia, io?eiaieo c ?ineei, i ia?o ca ana iaeanoae
aaiia, ui caaacia/othoue i?aaiiniaoeeoi/io aeni?anith aianaieo aaiia.
Aeey oeueiai iaiaoiaeii i?iiioi?e, noiinii c aioo?ieeioeiieie oaeoi?aie
?aaoeyoei?, oae ye aeni?aniy aianaieo aaiia iiae eiio?ieai
ianiaoeeoi/ieo eiinoeoooeaieo i?iiioi?ia iiaea i?ecaiaeeoe aei ii?ooaiiy
iaoaaieicio i cieaeaiiy aeeoo?caeaoiinoi o?ainaaiieo ?ineei (Matzke et
al.,1986). Oea i?iaeeeoiaaii iaiaoiaeiinoth io?eiaiiy o?ainaaiieo
?ineei, a yeeo iaaooi a i?ioeani o?ainoi?iaoei? iiai iciaee i?iyaeyeenue
ae eeoa a iaaieo i?aaiao.
Io?eiaii o?ainaaiii ?ineeie yaeythoue niaith oaeiae iiaeaeueii nenoaie
aeey aea/aiiy i?aaiiniaoeeoi/ii? i ?aaoeueiaaii? ciaiioiiie oaeoi?aie
aeni?ani? aaiia aeueo ?ineei.
Aeoiaey/e c aeuaneacaiiai, noa? c?icoiieith iaiaoiaeiinoue ?iaio ii
eeiioaaiith aaiia, ui eiaeothoue iiai oeiiii aeanoeainoi, ?aaoeyoi?ieo
iaeanoae, yei a caaacia/oaaee i?aaiiniaoeeoi/io aeni?anith aianaieo
aaiia oa ?ic?iaeo aoaeoeaieo iaoiaeee aeey o?ainoi?iaoei? i ?aaaia?aoei?
o?ainaaiieo ?ineei.
Ca’cie ?iaioe c iaoeiaeie i?ia?aiaie, ieaiaie, oaiaie.
?iaioa aeeiioaaeanue caiaeii iaoeiai-oaiaoe/iiai ieaio 2.1.10.12-
“Iaea?aeaiiy o?ainaaiieo ?ineei c nieuenueeiainiiaea?nueeeie ei?enieie
iciaeaie oa aea/aiiy iieaeoey?ieo iaoaiiciia aeni?ani? aaiia, yei
iaoiiaeththoue oei iciaee” aiaeaeieo aiiiiaeaia?i? Iinoeoooo
aiii?aaii/ii? oiii? oa iaooioiii? IAI Oe?a?ie.
Iaoa i caaea/i aeineiaeaeaiiy.
Iaoith aeaii? ?iaioe aoei io?eiaiiy o?ainaaiieo ?ineei ea?oiiei oa
othothio c aeni?ani?th naeaeoeaieo aaiia i aaiia, ui eiaeothoue
aiieiai/ii aeoeaii iaioeaee. Aeoiaey/e c oei?? iaoe, iniiaieie caaea/aie
?iaioe aoei:
1. Io?eiaoe o?ainaaiii ?ineeie othothio oa ea?oiiei c aeni?ani?th
eeiiiaaieo oeia?ieo aaiia .
2. Aeineiaeeoe aeni?anith oeia?iiai aaio npt-II iiae eiio?ieai
eeiiiaaiiai i?iiioi?o rpS 12 a ?icieo i?aaiao ?ineei-?aaaia?aioia
othothio.
3. I?iaanoe ii?iaiyeueia aeineiaeaeaiiy aoaeoeaiinoi i?iiioi?a pat 122
oa eiinoeoooeaiiai 35S i?iiioi?a AIEE a ?icieo i?aaiao o?ainaaiieo
?ineei.
4. Aeineiaeeoe oa?aeoa? oa ?iaaiue aeni?ani? a ?ineeiao ea?oiiei
neioaoe/iiai aaio aiiaea?iaeueiiai oaeoi?o ?inoo ethaeeie oa aaio
iiaa?oiaaiai aioeaaio ai?ono aaiaoeoo A (hEGF oa HBsAg).
Iaoeiaa iiaecia io?eiaieo ?acoeueoaoia.
Ia oano-nenoaiao othothio oa ea?oiiei aia?oa aaeaeinue iieacaoe, ui
aiaeia?aii iineiaeiaiinoi aaiiiieo AeIE oeeo ?ineei — rpS 12 oa pat 122
— iathoue aeanoeainoi ?ineeiieo i?iiioi?ia, yei caaacia/othoue
ei?aianiaoeeoi/io aeni?anith aaio npt-II oa aoeueainiaoeeoi/io
aeni?anith aaiia cat oa hEGF a o?ainaaiieo ?ineeiao othothio oa
ea?oiiei, aiaeiiaiaeii. Iaeieie c ia?oeo a naioi iieacaia iiaeeeainoue
aeni?ani? a ?ineeiao ea?oiiei aaio iiaa?oiaaiai aioeaaio ai?ono aaiaoeoo
A, yeee niaoeeoi/ii ca’yco?oueny c iiiieeiiaeueieie aioeoieaie i?ioe
HBsAg ne?iaaoee ethaeeie. Iaea?aeaii ?acoeueoaoe iiaeooue neoaoaaoe
iiaeaeeth aeey noai?aiiy aaeoeeiii? i?iaeoeoei? a ?noiaieo eoeueoo?ao.
Io?eiaii o?ainaaiii ?ineeie ea?oiiei c aeni?ani?th neioaoe/iiai aaio
aiiaea?iaeueiiai oaeoi?o ?inoo ethaeeie c iaoith aeei?enoaiiy oeeo
?ineei a eieoaaeueieo oeieyo.
I?aeoe/ia cia/aiiy iaea?aeaieo ?acoeueoaoia.
Oaeineiiaeaii iaoiaee/ii iiaeoiaee aaiaoe/ii? o?ainoi?iaoei? ?ineei
?aeiiaiiaioieie iieaeoeaie AeIE oa iaea?aeaii o?ainaaiii ?ineeie
othothio oa ea?oiiei c i?aaiiniaoeeoi/iith aeni?ani?th eeiiiaaieo aaiia.
Oei aaiii-iiaeaia?ii ?ic?iaee iiaeooue aooe aeei?enoaii aeey aea/aiiy
iieaeoey?ieo iaoaiiciia i?aaii-niaoeeoi/ii? aeni?ani? /oaea?iaeieo aaiia
a eeioeiao ?ineei oa a iiaeaeueoeo ?iaioao, ui iia’ycaii c iaea?aeaiiyi
o?ainaaiieo ?ineei c aeai?eiaith aeni?ani?th a oeaieiao /oaea?iaeieo
aaiia aeey iio?aa aiioaoiieiai?, nieuenueeiai ainiiaea?noaa oa
iaaeeoeeie.
Iniaenoee aianie aeena?oaioa.
Ani iniiaii ?acoeueoaoe ii aiaei?aoethaaiith oaoiiee o?ainoi?iaoei?
i?ioiieanoia othothio oa iie?iaoeueai/eiaeo aeeneia ea?oiiei, io?eiaiith
o?ainaaiieo ?ineei oa i?iaaaeaiith aiaeico aeni?ani? aianaieo a ieo
oeia?ieo aaiia io?eiaii aaoi?ii.
Ai?iaaoeiy ?acoeueoaoia aeena?oaoei?.
?acoeueoaoe aeena?oaoeieii? ?iaioe aeiiiaiaeaeenue ia OVII
Iiaeia?iaeiiio aaiaoe/iiio eiia?ani (Ai?iiiaai, Aiaeiy, 1993); II-io
(1993) oa III-io (1995) Neiiicioiao “Iiai iaoiaee aiioaoiieiai? ?ineei”
(Ioueii, ?iniy); ia Iiaeia?iaeiiio neiiicioii “Aiioaoiieiaiy oa
aaiaoe/ia iiaeaia?iy ?ineei” (Ee?a, 1994); ia II c’?caei iaaee/ieo
aaiaoeeia Oe?a?ie (Eueaia, 1995) oa ia eiioa?aioeiyo i naiiia?ao
Iinoeoooo aiii?aaii/ii? oiii? oa iaooioiii? IAI Oe?a?ie.
Ioaeieaoei?.
?acoeueoaoe aeena?oaoei? iioaeieiaaii a 8-e noaooyo iaoeiaeo aeo?iaeia
oa oacao 8-e eiioa?aioeie.
No?oeoo?a oa ia’?i ?iaioe. Aeena?oaoeiy aeeeaaeaia ia 122 noi?iieao
iaoeiiieniiai oaenoo i neeaaea?oueny ic anooio, iaeyaeo eioa?aoo?e,
iieno iaoa?iaeia i iaoiaeia aeineiaeaeaiiy, ?acoeueoaoia aeineiaeaeaiiy
oa ?o iaaiai?aiiy, caeii/aiiy, aeniiaeia oa nieneo oeeoiaaii?
eioa?aoo?e, yeee iinoeoue 162 aeaea?aea. ?iaioa i?iiethno?iaaia 2
oaaeeoeyie oa 16 ?enoieaie.
IAOA?IAEE OA IAOIAeE AeINEIAeAEAIUe
Iacioieueii i?ioiieanoe othothio iciethaaee ca noaiaea?oiith iaoiaeeeith
(Power and Chapman,1985) c ?ineei, ui iiaeo?eioaaeenue a eoeueoo?i in
vitro. Eoeueoo?a noa?eeueieo iaaiiia ea?oiiei aoea iiioeieiaaia c
iiaa?oiaai noa?eeiciaaieo “ai/ie” aacai?onieo aoeuea, iaaeaieo
Aieeinueeei iaoeiai-aeineiaeiei ia’?aeiaiiyi “Aeioa”. Iie?iaoeueae
iiaeoeoaaee in vitro ia iiaeeoieiaaiiio aeeaeeueiiio na?aaeiaeui MS
(Murashige and Skoog,1962).
Aeey i?yii? o?ainoi?iaoei? i?ioiieanoia othothio aeei?enoiaoaaee
ieaciiaee pDNt 23t oa pUC 23t (Aeiiainueeee i ii.,1986). Aeey
o?ainoi?iaoei? iie?iaoeueai/eiaeo aeeneia ea?oiiei aeei?enoiaoaaee
neiaeoth/i aaeoi?e:
A.tumefaciens 3850(pBin19:: pat122-cat) (?oiiaiei i ii.,1995);
A.tumefaciens 3850(pBin19::CaMV35S-HBsAg) (Aeiiainueeee i ii.,1995);
A.tumefaciens 3850(pBin19::CaMV35S-hEGF) oa
A.tumefaciens 3850(pBin19:: pat122-hEGF) (Salmanian et al.,1996).
O?ainoi?iaoeith i?ioiieanoia i?iaiaeeee ca iiaeeoieiaaiith iaie
iaoiaeeeith Oeeioi (Shillito et al.,1983). O?ainaaiii ?ineeie othothio
?aaaia?oaaee i iiaeo?eioaaee a eoeueoo?i ca iaoiaeii Iio?ieona (Potrykus
and Shillito,1985). Iie?iaoeueai/eiai aeenee ea?oiiei o?ainoi?ioaaee
niiaeoeueoeaoaaiiyi c aa?iaaeoa?iaeueieie aaeoi?aie. Ia anio aoaiao
o?ainoi?iaoei? oa ?aaaia?aoei? aeei?enoiaoaaee aeeaeeueia na?aaeiaeua
MLS (Iaaeaaae?aa i ii.,1997). Naeaeoeith o?ainoi?iaioia o anio aeiaaeeao
i?iaiaeeee ia na?aaeiaeuao c 100 ia/e noeueoaoo eaiaiioeeio.
Aiaeic aeni?ani? oeia?iiai aaio npt-II i?iaiaeeee ca iaoiaeii ?aena
(Reiss et al.,1984), aaio cat — ca iaoiaeii Ai?iaia (Gorman et
al.,1985). Aeni?anith oeia?ieo aaiia hEGF oa HBsAg aeyaeyee iaoiaeii
iioii-ni?aaioiiai aiaeico (ELISA) c aeei?enoaiiyi eiia?oeieieo iaai?ia
iiiieeiiaeueieo aioeoie — QuantikineTM Human EGF Immunoassay kit oa
Micro Elisa System Hepanostica HBsAg caiaeii c i?ioieieaie
oi?i-ae?iaieeia.
Iayaiinoue o?aine?eioia hEGF a aeno?aeoao o?ainaaiieo ?ineei ea?oiiei
iiaeoaa?aeaeaia aeio-aeio aia?eaeecaoei?th noia?ii? ?IE.
I/euaii ca aeiiiiiaith iioii-aoiiii? o?iiaoia?aoi? iaioeaee HBsAg
aiaeicoaaee aeaeo?ioi?acii o iieiae?eeaiiaeiiio aaei, aeei?enoaaoe
ia?ea?e iieaeoey?ii? aaae.
?ACOEUeOAOE AeINEIAeAEAIUe OA ?O IAAIAI?AIIss
1. Aeineiaeaeaiiy oa?aeoa?o aeni?ani? eeiiiaaiiai o?aaiaioo aaiiiii?
AeIE othothio a o?ainoi?iiaaieo oeaieiao othothio.
sse aeaea?aea i?iiioi?ieo iineiaeiaiinoae cae/aeii aeei?enoiaothoue
eeiiiaaii aaie, ui ooieoeiiiothoue a ?ineeiao. Aiaeiii, ui aeayei c
ooieoeiiioth/eo a ?ineeiao i?iiioi?ia caeaoii iiioeithaaoe
o?aine?eioeith a eeioeiao E.coli (Herrera-Estrella et al.,1983) i, ioaea
, ?o iiaeia aiaeae?aoe ii i?iyaeaiith ooieoei? a aaeoa?iaeueieo
eeioeiao. Oeae iiaeoiae aoa aeei?enoaiee aeey eeiioaaiiy iineiaeiaiinoae
yaea?ii? AeIE othothio, yei ooieoeiiioaaee ye i?iiioi?e a eeioeiao
E.coli. I?eionoeee, ui aeayei c oaeeo iineiaeiaiinoae iiaee a
ooieoeiiioaaoe ye i?iiioi?e i a eeioeiao ?ineei (Aeiiainueeee i
ii.,1986). Aeey ia?aai?ee oeueiai i?eiouaiiy aeiaaeeiai o?aaiaioe
aaiiiii? AeIE othothio aaoaeiaoaaee ia?aae eiaeoth/ith iineiaeiaiinoth
aaio npt-II aac i?iiioi?a i iioaioeieii i?iiioi?e aeyaeyee ii aeoeaiinoi
NPT-II a aaeoa?iaeueieo eeioeiao. Iaeia c io?eiaieo eiino?oeoeie a
ieaciiaei pDNt 23t, ui iinoeea anoaaeo aeiaaeeiith 500 i.i. ia?aae
no?oeoo?iith /anoeiith aaio npt-II, aoea iniaeeai aoaeoeaia a E.coli,
oiio ?? aeei?enoaee aeey o?ainoi?iaoei? i?ioiieanoia othothio.
I?ioiieanoe othothio ? iaeaaeueiith i aeia?a aea/aiith ?aoeeii?ioiith
nenoaiith aeey /oaea?iaeii? AeIE, /anoi a oi?ii ieaciiae, caaacia/oth/e
?? iiei?ii?aoeith i aeni?anith. O?ainoi?iaoeiy ?ineeiieo i?ioiieanoia
?aeiiaiiaioieie iieaeoeaie AeIE ia? oo ia?aaaao, ui ?aaoeyoeiy i
ooieoeiy /oaea?iaeieo aaiia iiaea aooe aea/aia a ?o i?e?iaeiueiio
eeioeiiiio ioi/aiii, a oioiiioaioiinoue ?ineeiii? eeioeie aeicaiey?
?aaaia?oaaoe oeieo ?ineeio, caaacia/oth/e oaeei /eiii aaiaoe/iee i
iieaeoey?iee aiaeic iioiinoaa. A ?acoeueoaoi o?ainoi?iaoei? oa
?aaaia?aoei? aoee io?eiaii nii noieeeo aei eaiaiioeeio ?ineei, a yeeo
aeni?anith aaio npt-II aecia/aee ca iaoiaeii ?aena (Reiss et al.,1984).
?acoeueoaoe i?aaenoaaeaii ia ?en.1, c yeiai aeaeii, ui aeoeaiinoue
NPT-II iaeneiaeueia a ei?aiyo, aeaui neaaoa a noaaeao i i?aeoe/ii ia
aeyaeaia a eenoyo, ui naiae/eoue i?i ei?aianiaoeeoi/iee oa?aeoa?
aeni?ani? aaio npt-II. E?ii oiai, ?iaaiue aeni?ani? iiae eiio?ieai
i?iiioi?ii? iineiaeiaiinoi othothio iiiioii ieae/ee, iiae o aeiaaeeo
iiceoeaiiai eiio?ieth. ?icii?e aieeiaeo i?iaeoeoia oeia?ieo aaiia npt-II
ye a aeineiaei, oae i a eiio?iei i?eaeecii iaeiaeiai, oi/a a aeineiaei
iieaeoey?ia iana aieeo aeaui aeua, a ?iciiaeieaiiy eiai a aaei aieueo
aeeoocia. Oea iiaea aooe ca’ycaii c aiaenooiinoth a ieaciiaei pDNt 23t
aoea?iioe/iiai 3′-?aaoeyoi?iiai aeaiaioo, ui iiaea aooe i?e/eiith
iieaeoey?ii? iaaiiiaaiiinoi i?IE i aieeiaiai i?iaeoeoo, a oaeiae, ui
aieueo ai?iaiaeii, eiai noaaieueiinoi i oa?iaioaoeaii? aeoeaiinoi.
Aia?eaeecaoeiy ii/aii? ieaciiaee pDNt 23t c aaiiiiith AeIE othothio i
oei?iieanoiith AeIE iieacaee, ui AeIE-anoaaea ieaciiaee pDNt 23t
aia?eaeecoaaeanue i c yaea?iith, i c oei?iieanoiith AeIE. Oaeiae aoei
aeyaeaii, ui anoaaea a 470 ia? iniia ieaciiaee pDNt 23t iaea 100%
aiiieiaith c o?aaiaioii oei?iieanoii? AeIE othothio, yeee eiaeo? /anoeio
aaio ?eainiiiiai aieeo S 12 (Grzhelyak et al., 1996).
?en.1. Aecia/aiiy aeoeaiinoi NPT-II a i?aaiao o?ainaaiieo ?ineei
othothio: A,B,C – eeno, noaaei, ei?iiue o?ainaaiii? ?ineeie, ui iana
ieaciiaeo pDNt23t; D- eeno o?ainaaiii? ?ineeie c ieaciiaeith pLGV23neo
(eiio?ieue).
1.1. Aeineiaeaeaiiy o?aice?ioii? aeni?ani? aaio cat a i?ioiieanoao
othothio.
Ineieueee in vivo eeiiiaaiee o?aaiaio AeIE oei?iieanoiiai aaiiio ia ia?
aeanoeainoae i?aaii-niaoeeoi/iiai i?iiioi?o, iiaeia i?eionoeoe, ui
aeni?aniy c oeueiai i?iiioi?o, yeo ie niinoa?iaaee a o?ainaaiieo
?ineeiao othothio, coiiaeaia iiceoeieiei aoaeoii. Aeey ia?aai?ee oeueiai
i?eiouaiiy aai cat iiae eiio?ieai iineiaeiaiinoi rpS12 aoa aaaaeaiee a
i?ioiieanoe othothio a neeaaei ieaciiaee pUC23 cat, i /a?ac 48 aiaeei
eoeueoeaoaaiiy a oeeo i?ioiieanoao aecia/aee /aniao aeni?anith aaio cat
ca iaoiaeii Ai?iaia (Gorman et al., 1985). Ia ?aaeiiaaoia?aoi
o?iiaoia?aie (?en.2) aeaeii, ui a aeineiaei ?aaeoeiy i?ieoea aei eiioey
i ooai?eeenue ani o?e oi?ie aoeaoeeueiaaiiai oei?aioaiieieo, oiaoi,
aeineiaeaeoaaiee aeno?aeo ia? CAT-aeoeaiinoue. C oeueiai aeoiea?, ui
o?aaiaio yaea?ii? AeIE othothio ieaciiaee pDNt 23t, ia? aeanoeainoi
i?iiioi?o i iiaea iiioeithaaoe o?aine?eioeith. Oie oaeo, ui eeiiiaaiee
o?aaiaio yaea?ii? AeIE othothio aia?eaeeco?oueny c o?aaiaioii
oei?iieanoii? AeIE othothio aeaco?, ui iineiaeiaiinoi oei?iieanoii? AeIE
iiaeooue aooe i a yaea?iie AeIE. Oea ocaiaeaeo?oueny i c oe?iei
ni?eeiyoith aiaeineiaiioe/iith oai?i?th (Weeden et al., 1981). Aaaaoi
aaiia, ia?ainii eiaeiaaieo a oei?iieanoiiio aaiiii, aoee, i/aaeaeii,
ia?aianaii i?ioyaii aaiethoei? a yae?a. I?i oaeo iiaeeeioeiio
“iia?aoeith” aaiia c oei?iieanoia
?en.2. CAT-aeoeaiinoue a i?ioiieanoao othothio, o?ainoi?iiaaieo
ieaciiaeith pUC23t:
A – CAT-aeoeaiinoue a eeioeiao E. coli, aeei?enoaieo ye ia?ea?
aoeaoeeueiaaii? oi?ie 14C-oei?aioaiieieo; B – CAT-aeoeaiinoue a
o?ainoi?iiaaieo i?ioiieanoao othothio.
a yae?a iiaiaeiieythoue ?yae aaoi?ia (Oliver et al., 1990; Baldauf et
al., 1990). Ineieueee ia?aiiuaiiy aaiia ia?iiaee/ii cono?i/aeinue a
aaiethoei? ?ineei, caea?oueny, ui aieueoinoue ic ieanoeaeieo aaiia
iathoue “aeaieieeia” a yae?ao, aea aiie aoee aeyaeaii ye ei?ioei (1.0
Kb) /e aeiaai (eieueea Kb) iineiaeiaiinoi (Du Jardin et al.,1990).
2. Io?eiaiiy o?ainaaiieo ?ineei ea?oiiei c aeni?ani?th oeia?iiai aaio
cat iiae eiio?ieai i?iiioi?o aaio iaoaoeio eeano I.
Iaeii?th ic neeaaeiaeo oniioo aaiaoe/ii? o?ainoi?iaoei? ? i?aaeeueiee
aeai? aenieaioia, yei iiaeiii aooe /ooeeaeie aei iioieoaaiiy
aa?iaaeoa?i?th i iaoe aenieee ?aaaia?aoeieiee iioaioeiae. Ie oanooaaee
aenieaioe eenoea, noaaea oa iie?iaoeuea ea?oiiei /ioe?ueio ni?oia.
Aeyaeeinue, ui iaeaieueo aenieee ?aaaia?aoeieiee iioaioeiae iathoue
iie?iaoeueae ni?oia Iaanueeee oa Eoaianueeee. Iaie oaeiae aoee
iiaeia?aii oiiae aeey oaeaeeiai io?eiaiiy iie?iaoeuea in vitro.
Ineieueee ea?oiiey ni?oo Iaanueeee iaea iaee?auo caeaoiinoue aei
ooai?aiiy iie?iaoeuea, ?? aeei?enoiaoaaee aeey o?ainoi?iaoei?.
Iie?iaoeueai/ee aieii aei 6 iinyoeia, ia?icaee aeeneaie oiaueiith 1-2 ii
i niiaeoeueoeaoaaee c A.tumefaciens c aiia?iei aaeoi?ii pBin19, ui iana
aai cat iiae eiio?ieai i?iiioi?a aaio iaoaoeio pat122. ?ineeie ea?oiiei,
ui ?aaaia?oaaee ia iie?iaoeueai/eiaeo aeeneao, o?ainoi?iiaaieo
A.tumefaciens 3850 (pBin19:: pat122-cat), aiaeicoaaee ia iayaiinoue
aeni?ani? ia?ea?iiai aaio cat. Ineieueee aai cat aiaenooiie a oeaieiao
ii?iaeueieo ?ineei, oi iayaiinoue oa?iaioaoeaii? aeoeaiinoi CAT a
?ineeiao-?aaaia?aioao iiaea neoaoaaoe aeieacii ?o o?ainaaiii? i?e?iaee.
CAT-aeoeaiinoue aieeiaeo aeno?aeoia aoea aecia/aia ca iaoiaeii Ai?iaia
(Gorman et al., 1985). Eiioeaio?aoei? noia?iiai aieeo aeey eiaeii? oi/ee
aoee iaeiaeiai a onio aeiaaeeao. Uia aecia/eoe oa?aeoa? aeni?ani?
aianaiiai aaio, aeoeaiinoue eiai i?iaeoeoo aecia/aee a noaaeao, ei?aiyo
i iie?iaoeueaao ?ineei — ?aaaia?aioia. sse iiceoeaiee eiio?ieue
aeei?enoiaoaaee eeioeiiee aeno?aeo ooaio E.coli, ui iinoeoue ieaciiaeo
pBR 325 c aaiii cat , a a yeinoi iaaaoeaiiai eiio?ieth ia aei?iaeeo
iaiineee aeieaioo ?aaeoeieii? noiioi c aeno?aeoii iie?iaoeuea
iao?ainoi?iiaaieo ?ineei. Ani ?aaeoei? i?iaiaeeee a iaeiaeiaeo oiiaao. C
o?iiaoia?aie aeaeii (?en.3), ui iaeneiaeueia aeoeaiinoue CAT
niinoa?iaa?oueny a iie?iaoeueaao o?ainoi?iiaaieo ?ineei i i?aeoe/ii
aiaenooiy a eenoyo, noaaeao i ei?aiyo. Oeae oaeo aeaco? ia
aoeueainiaoeeoi/iee oa?aeoa? aeni?ani? oeia?iiai aaio, yeee
iai?aaey?oueny eeiiiaaiei i?iiioi?ii. Ineieueee aeni?aniy aaio cat, ui
iai?aaey?oueny i?iiioi?ii pat122 , i?aeoe/ii aiaenooiy a ei?aiyo, iiaeia
aiaeianoe eiai aei eeano I, oae ye aiaeiii, ui aaie iaoaoeio eeano I
caeaoii iai?aaeyoe aeniei ?iaii aeni?ani? aeeeth/ii a aoeueaao
(Jefferson et al., 1990).
Aeey ii?iaiyiiy aoaeoeaiinoi aeni?ani? aaio cat iiae eiio?ieai i?iiioi?o
pat122 ia?aeaeueii aoea i?iaaaeaia o?ainoi?iaoeiy c aeei?enoaiiyi 35S
i?iiioi?o AIEE (ieaciiaea pCaMV35S::cat), yeee caaacia/o? aeniei ?iaii
aeni?ani? a onio oeaieiao o?ainoi?iiaaieo ?ineei. Aeaii, i?aaenoaaeaii
ia ?en.4, iieacothoue, ui neea iaoaoeiiaiai i?iiioi?o aeaui aieueoa,
iiae 35S i?iiioi?o. I?ioa, ?iaaiue aeoeaiinoi, ui niinoa?iaaany a
aoeueaao c iaoaoeiiaei i?iiioi?ii B33 (Paiva et al., 1983) ciaoiaeeany a
oeo aea ?aieao, ui aoee iieacaii aeey oaeiai neeueiiai i?iiioi?o, ye 35S
i?iiioi? AIEE oa oioineioaoe/iiai ST-LS1 aaio (Liu et al.,1990).
?en. 3. Aeineiaeaeaiiy CAT a aeno?aeoao eenoea, noaaea oa iie?iaoeuea
?ineei ea?oiiei, o?ainoi?iiaaieo pat 122::cat: 1,4 — iie?iaoeueae; 2 —
aeno?aeo E.coli c pBR 325;
3 — iao?ainoi?iiaaia ?ineeia (iie?iaoeueae); 5 — noaaea e eenoy; 6 —
ei?aii.
?en. 4. Ii?iaiyiiy aeoeaiinoi CAT a ?ineeiao ea?oiiei, o?ainoi?iiaaieo
ieaciiaeaie pDEcat oa pCaMVcat: 1 – pCaMVcat (aoeueae); 2 – pDEcat
(eenoy); 3 – pDEcat (eenoy, iiaeoeiaaii 8% oeoe?icith); 4,5-pDEcat
(aoeueae); 6-E.coli(pBR 325); 7 – 14N-oei?aioaiieie.
Iniaeeainoue aeni?ani? aaiia iaoaoeio eeano I iieyaa? a oiio, ui aiia
iiaea ?aaoethaaoenue aiinoii oeoe?ice a aeeaeeueiiio na?aaeiaeui. Ia
?en.4 (aei?iaeea 3) iieacaii aieea oeoe?ice ia aeni?anith oeia?iiai aaio
pat122-cat — aeno?aeoe c eenoy o?ainaaiieo ?ineei, ?aaaia?iaaieo ia
na?aaeiaeui c 8% oeoe?icith, iathoue CAT-aeoeaiinoue, oi/a e aeaui
ieae/o a ii?iaiyiii c iie?iaoeueaaie (aei?iaeee 4 i 5).
3.Aeni?aniy aaio aiiaea?iaeueiiai oaeoi?o ?inoo ethaeeie a
?ineeiao ea?oiiei iiae eiio?ieai i?iiioi?o aaio iaoaoeio pat122.
Oeia?iee aai hEGF aoa oiii/ii neioaciaaiee i ceeoee c i?iiioi?ii pat122
i, aeey ii?iaiyiiy, c i?iiioi?ii 35S AIEE (Salmanian et al., 1996).
Iiceoeaii o?ainoi?iaioe ?aaaia?oaaee ia na?aaeiaeui c eaiaiioeeiii iiney
niiaeoeueoeaoaaiiy iie?iaoeueai/eiaeo aeeneia ea?oiiei c aa?iaaeoa?i?th.
Iayaiinoue o?aine?eioia hEGF a aeno?aeoao o?ainaaiieo ?ineei
iiaeoaa?aeaeaia aeio-aeio aia?eaeecaoei?th noia?ii? ?IE (?en.5).
Eieueeiniee aiino iaioeaeo hEGF a ?ineeiieo aeno?aeoao aeey aeaio
eiino?oeoeie aecia/aee iaoiaeii ELISA.
?en.5. Aeio-aeio aiaeic noia?ii? ?IE, icieueiaaii? c hEGF — o?ainaaiieo
oa eiio?ieueieo iao?ainoi?iiaaieo ?ineei: 1 — iiceoeaiee eiio?ieue; 2 —
iao?ainoi?iiaaia ?ineeia; 3 — hEGF — o?ainoi?iiaaia ?ineeia.
C ?en.6 aeaeii, ui iaeneiaeueiee aiino — aei 180 ia ia 1ia ?ic/eiieo
aieeia aeyaeaii a iie?iaoeueaao, eiee aeni?aniy oeia?iiai aaio
iai?aaeyeanue i?iiioi?ii pat122. Aeyaeaii oaeiae cia/iee aiino
iaaiaeiiiai iaoa?iaeo, ui ?aaaoaaa ci niaoeeoi/ieie aioe-hEGF
aioeoieaie, i?aaenoaaeaieie a eiia?oeieiiio iaai?i. Iniaeeai aaeeea
eieueeinoue eiai aeyaeeanue a ei?aiyo. Iiaeiaio ea?oeio niinoa?iaaa Oiai
a eenoeao othothio (Higo et al.,1993). Oeae oaeo ua ia ia?
caaeiaieueiiai iiyniaiiy, aea iaaeaaiy iaeaioeoieaoeiy o?ainiaia?aiiiai
?aoeaioi?o PRO 25, ui iinoeoue eieueea EGF-iiaeiaieo aiiii-eeneioieo
iiaoi?ia, iiaeeeai iiaea a aeiiiiiaoe iiynieoe oeae oaiiiai (Kohorn et
al., 1992).
ia/ia ?ic/eiiiai aieeo
wmetafile8? ??AE;????c;??????????????§%???
???????yyy?????c;??C
?I???§%????§%????(???%??§????????ov??z??p??????????????yyy?yyy
yyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyo???yyy
yyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyo???yyy
yyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyo???yyy
yyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyo???yyy
yyyyyyyyyy
?en.6. ELISA aeey hEGF a ?ic/eiieo o?aeoeiyo aeno?aeoia ?icieo oeaiei
?ineeie: a — ei?aii, b — eenoy, c — iie?iaoeueae; 1 — iao?ainoi?iiaaii
?ineeie, 2 — 35SCaMV i?iiioi?; 3 — i?iiioi? aaio iaoaoeio.
sse aeaeii c oiai ae ?en.6, ?iaaiue aeni?ani? hEGF iiae eiio?ieai
i?iiioi?o pat122 iaeaea aaeai/i aeuee a ii?iaiyiii c 35S i?iiioi?ii
AIEE, ui naiae/eoue i?i iiaeeeainoue eiai iiaeaeueoiai iiaeaeuaiiy.
4.Ei?aia-niaoeeoi/ia aeni?aniy aaio iiaa?oiaaiai aioeaaio ai?ono
aaiaoeoo A a ?ineeiao ea?oiiei.
I’youe noieeeo aei eaiaiioeeio iaaiiia, ui ?aaaia?oaaee iiney
o?ainoi?iaoei? iie?iaoeueai/eiaeo aeeneia oeia?iei aaiii 35S
CaMV::HBsAg, aeei?enoaee aeey aiaeico aeni?ani? oeueiai aaio, yeo
aecia/aee iaoiaeii iioii-ni?aaioiiai aiaeico c aeei?enoaiiyi
iiiieeiiaeueieo aioeoie i?ioe HBsAg ne?iaaoee ethaeeie. Aeaii
iiaeoaa?aeaeothoue (?en.7), ui HBsAg, yeee aeni?ano?oueny a ?ineeiao
ea?oiiei, niaoeeoi/ii ca’yco?oueny c iiiieeiiaeueieie aioeoieaie.
Eiioeaio?aoeiy HBsAg a aieeiaeo aeno?aeoao ?ineeiieo oeaiei aa?ithaaea
aiae 3-11 ia/ia a eenoeao aei 76-83 ia/ia ?ic/eiieo aieeia a ei?aiyo.
I?eaeecii oaeee aea ?iaaiue aeni?ani? HBsAg a eenoyo othothio aeyaeee
aeineiaeaeaiiy Iaeniia (Mason et al.,1992). A ei?aiyo ?iaaiue aeni?ani?
HBsAg a 5-10 ?acia aeuee, iiae a eenoyo o?ainaaiieo ?ineei ea?oiiei, ui,
iiaeeeai, ca’ycaii c aeoeaoaaiiyi i?iiioi?o 35SCaMV cis-aeith/ei
aeaiaioii as-I, ui ca’yco?oueny c yaea?iei aieeii ASF-I, eiioeaio?aoeiy
yeiai a ei?aiyo a 5-10 ?acia aieueoa, iiae a eenoeao (Neuhaus et
al.,1994).
Aeaeo?ioi?acii a iieiae?eeaiiaeiiio aaei c iaai?ii ia?ea?ieo aieeia
iieacaii, ui a o?ainaaiieo ?ineeiao ea?oiiei neioacothoueny naia HBsAg
iaioeaee, yei aeyaeaii a oi?ii ioeueoeia?ia. Oei ?acoeueoaoe
ocaiaeaeothoueny c ?aiioa iioaeieiaaieie niinoa?aaeaiiyie, caiaeii c
yeeie a aaaaoueio aeiaaeeao aioeoiea cono?i/athoueny nei?ioa a
ioeueoeia?iie oi?ii,
ia/ia ?ic/eiieo aieeia
wmetafile8? ??o5????I5??????????????”???
???????yyy?????I5??C
?I???”????”????(?????”????????Pk??z??p??????????????yyy?yyy
yyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyya???yyyyyyy
yyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyya???yyyyyyyyyyy
yyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyya???yyyyyyyyyyyyyyy
yyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyya???yyyyyyyyyyyyyyyyyyy
yyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyya???yyyyyyyyyyyyyyyyyyth?yy
yyyyyyyth?yyyyyyyyyyueyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyya???yyyyyyyyyyyyyyyyyyth?yyy
yyyyyyth?yyyyyyyyyyueyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyya???yyyyyyyyyyyyyyyyyyth?yyyy
yyyyyth?yyyyyyyyyynCyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyya???yyyyyyyyyyyyyyyyyyth?yyyyyy
yyyth?yyyyyyyyyyyCyyyyyyyyyyyyyyyyyyyyya???yyyyyyyyyyyyyyyyyyth?yyyyyyyy
yy
?en.7.ELISA aeey HBsAg a ?ic/eiieo o?aeoeiyo aeno?aeoia o?ainaaiieo
?ineei: 1 — ei?aii; 2 — eenoy; 3 — iie?iaoeueae.
iiae a iiiiia?iie (Murray et al.,1988) i ui i?ioyaii aoiiii? i/enoee
HBsAg iia aooe ia?aoai?aiee a aeenoeueoiaeii-ca’ycaii aeeia?e (Thanh et
al.,1991) /e ioeueoeia?e (Wampler et al.,1985). Aeni?aniy aaio HBsAg a
?ineeiieo oeaieiao i?aaenoaaey? iniaeeaee iioa?an ye i?eaaaeeaa
iiaeeeainoue aeei?enoaiiy o?ainaaiieo ?ineei a yeinoi “?noiaieo”
aaeoeei.
AENIIAEE
1. Iaoiaeii i?yiiai aaaaeaiiy aaiia io?eiaii o?ainaaiii ?ineeie othothio
c ei?aianiaoeeoi/iith aeni?ani?th oeia?iiai aaio npt-II.
2. Iieacaii, ui eeiiiaaiee o?aaiaio yaea?ii? AeIE othothio, yeee
aiaeiiaiaea? 3′- /anoeii oei?iieanoiiai aaio rpS12, ia? aeanoeainoi
?ineeiiiai i?iiioi?a.
3. Anoaaea rpS12 o?aaiaioo yaea?ii? AeIE othothio ia?aae aaci?iiioi?iei
aaiii npt-II caaacia/o? ei?aianiaoeeoi/io aeni?anith oeueiai aaio.
4. Ca aeiiiiiaith Agrobacterium-iiina?aaeeiaaii? o?ainoi?iaoei? io?eiaii
o?ainaaiii ?ineeie ea?oiiei c aeni?ani?th oeia?ieo aaiia cat, hEGF oa
HBsAg.
5. Iieacaii, ui eeiiiaaiee i?iiioi? aaio iaoaoeio pat 122 iai?aaey?
/ioei ae?aaeaio aoeueainiaoeeoi/io aeni?anith aaiia cat oa hEGF.
6. I?iiioi? aaio iaoaoeio caaacia/o? iaeaea aaeai/i aeuee ?iaaiue
aeni?ani? oeia?iiai aaio hEGF a iie?iaoeueaao o?ainaaiieo ?ineei
ea?oiiei, iiae 35S i?iiioi? AIEE.
7. A ei?aiyo o?ainaaiieo ?ineei ea?oiiei, ui iinoyoue aai HBsAg iiae
eiio?ieai eiinoeoooeaiiai 35S i?iiioi?a AIEE, ?iaaiue aeni?ani? a 5 — 10
?acia aeuee, iiae a eenoiaie oeaieii.
Nienie ?iaio, iioaeieiaaieo ii oaii aeena?oaoei?
1. Aeiiaineee I.I., Aaieia E.A., Eiaaeaiei I.A., Iaaeaaaeaaa O.A.,
Aaeeei A.I., Aaca?yi E.A. Eeiie?iaaiea o?aaiaioa AeIE oaaaea,
iaeaaeathuaai naienoaaie i?iiioi?a a o?ainaaiiii ?anoaiee //Iieaeoey?iay
aeieiaey.-1989.-O.23.- n.1391-1399.
2. Yefimenko I.M., Medvedeva T.V.,Kovalenko P.G., Gazaryan K.G., Galkin
A.P. Organ-specific gene expression in transgenic potato: the cloning a
new promoter of a class I patatin gene. // Aeiiieeia?u e eeaoea.-
1995.-O.11.-N.6.-n.96-103.
3. Domansky N., Ehsani P.,Salmanian A.-H., Medvedeva T.V. Organ —
specific expression of hepatitis B surface antigen in potato. //
Biotechnology Let.- 1995.-17.-p.863-866.
4. Ehsani P., Medvedeva T., Domansky N. Expression of hepatitis B
surface antigen in transgenic potato plants // Iranian J. of Medical
Sci.-1995.-V.20.-N.1-2.-pp.42-47.
5. Kovalenko P.G., Yefimenko I.M., Schuman N.V., Medvedeva T.V.,
Gazaryan K.G., Galkin A.P. Genetic transformation of potato (Solanum
tuberosum L.) using a binary Agrobacterium tumefaciens vector with
patatin promoter class I // Aeiiieeia?u e eeaoea. — 1996. —O.12. —N.2. —
n.42-46.
6. Grzhelyak N.V., Galkin A.P., Gening L.V., Medvedeva T.V., Lioshina
L.G., Bulko O.V., Gazaryan K.G. Chloroplast “cryptic”
promoter can be activated upon their transfer to plant nuclear
genome // Aeiiieeia?u e eeaoea.-1996.-O.12.-N.6.-n.87-93.
7. Salmanian A.-H., Gushchin A., Medvedeva T., Noori-Daloii M.R.,
Domansky N. Synthesis and expression of the gene for human epidermal
growth factor in transgenic potato plants // Biotechnology
Let.-1996.-v.18.-N.9. —pp.1095-1098.
8. Iaaeaaaeaaa O.A., Aoeiaiei E.I., A?aeaeye I.A., Aaca?yi E.A., Aaeeei
A.I. Eniieueciaaiea iee?ieeoaiaauo aeeneia aeey o?ainoi?iaoeee
ea?oioaey iin?aaenoaii eeoaianiaoeeoe/aneeo aaeoi?ia ia iniiaa
Agrobacterium tumefaciens // Oeceieiaey e aeioeiey eoeueoo?iuo
?anoaiee.-1997.-o.29.-N.3.-n.187-193.
Iaaeaaae?aa O.A. Io?eiaiiy o?ainaaiieo ?ineei othothio oa ea?oiiei c
ei?aianiaoeeoi/iith oa aoeueainiaoeeoi/iith aeni?ani?th oeia?ieo aaiia.-
?oeiien.
Aeena?oaoeiy ia caeiaoooy a/aiiai nooiaiy eaiaeeaeaoa aiieiai/ieo iaoe
ca niaoeiaeueiinoth 03.00.15-aaiaoeea, Iinoeooo eeioeiii? aiieiai? i
aaiaoe/ii? iiaeaia?i? IAI Oe?a?ie, Ee?a, 1998.
Aeena?oaoeiy i?enay/aia io?eiaiith o?ainaaiieo ?ineei othothio oa
ea?oiiei c aeni?ani?th oeia?ieo aaiia, ui iai?aaey?oueny eeiiiaaieie
i?aaiiniaoeeoi/ieie i?iiioi?aie. Ceeooyi iacioieueieo i?ioiieanoia c
ieaciiaeiith AeIE io?eiaii o?ainaaiii ?ineeie othothio c
ei?aianiaoeeoi/iith aeni?ani?th aaio npt-II, ui iai?aaey?oueny
eeiiiaaiei i?iiioi?ii rpS12. A o?ainaaiieo ?ineeiao ea?oiiei,
?aaaia?iaaieo c iie?iaoeueai/eiaeo aeeneia iiney niiaeoeueoeaoaaiiy c
Agrobacterium, i?iaeaiiino?iaaia aoeueainiaoeeoi/ia aeni?aniy aaiia cat
oa hEGF, ui iai?aaey?oueny i?iiioi?ii aaio iaoaoeio pat 122 oa
ei?aianiaoeeoi/ia aeni?aniy aaio HBsAg iiae eiio?ieai 35S i?iiioi?o
AIEE.
Eeth/iai neiaa: o?ainaaiii ?ineeie; ei?aia-oa aoeueainiaoeeoi/ia
aeni?aniy; i?iiioi? aaio iaoaoeio; aai aiiaea?iaeueiiai oaeoi?o ?inoo
ethaeeie; aai iiaa?oiaaiai aioeaaio ai?ono aaiaoeoo A.
Iaaeaaaeaaa O.A. Iieo/aiea o?ainaaiiuo ?anoaiee oaaaea e ea?oioaey n
ei?ianiaoeeoe/aneie e eeoaianiaoeeoe/aneie yeni?anneae oeia?iuo aaiia.-
?oeiienue.
Aeenna?oaoeey ia nieneaiea o/aiie noaiaie eaiaeeaeaoa aeieiae/aneeo iaoe
ii niaoeeaeueiinoe 03.00.15 — aaiaoeea, Einoeooo eeaoi/iie aeieiaee e
aaiaoe/aneie eiaeaia?ee IAI Oe?aeiu, Eeaa, 1998.
Aeenna?oaoeey iinayuaia iieo/aieth o?ainaaiiuo ?anoaiee oaaaea e
ea?oioaey n yeni?anneae oeia?iuo aaiia, eioi?ay iai?aaeyaony
eeiie?iaaiiuie i?aaiiniaoeeoe/aneeie i?iiioi?aie. Neeyieai iacioeeueiuo
i?ioiieanoia n ieacieaeiie AeIE iieo/aiu o?ainaaiiua ?anoaiey oaaaea n
ei?ianiaoeeoe/aneie yeni?anneae aaia npt-II, iai?aaeyaiie eeiie?iaaiiui
i?iiioi?ii rpS12. A o?ainaaiiuo ?anoaieyo ea?oioaey, ?aaaia?e?iaaaoeo n
iee?ieeoaaiueeiauo aeeneia iinea nieoeueoeae?iaaiey n Agrobacterium,
i?iaeaiiino?e?iaaia eeoaianiaoeeoe/aneay yeni?anney aaiia cat e hEGF,
iai?aaeyaiay i?iiioi?ii aaia iaoaoeia pat122 e ei?ianiaoeeoe/aneay
yeni?anney aaia HBsAg iiae eiio?ieai 35S i?iiioi?a AIOeE.
Eeth/aaua neiaa: o?ainaaiiua ?anoaiey; ei?ia-e eeoaianiaoeeoe/aneay
yeni?anney; i?iiioi? aaia iaoaoeia; aai yieaea?iaeueiiai oaeoi?a ?inoa
/aeiaaea; aai iiaa?oiinoiiai aioeaaia ae?ona aaiaoeoa A.
Medvedeva T.V. The obtaining of transgenic tobacco and potato plants
with root-specific and tuber-specific expression of chimeric genes . —
The manuscript.
Thesis for gaining a scientific degree of Candidate of Biological
Sciences on speciality 03.00.15-Genetics, Institute of Cell Biology and
Genetic Engineering, National Academy of Sciences of Ukraine, Kyiv,1998.
The dissertation is devoted to obtaining of transgenic tobacco and
potato plants with expression of chimeric genes that is driven by cloned
organ-specific promoters. By fusion of mesophyl protoplasts with plasmid
DNA were obtained the transgenic tobacco plants with root specific
expression of chimeric npt-II gene driven by cloned promoter rpS12. In
transgenic potato plants that regenerated from microtuber discs after
cocultivation with Agrobacterium were shown tuber specific expression of
cat and hEGF genes driven by pat122 promoter and root-specific HBsAg
gene expression driven by 35SCaMV promoter.
Key words: transgenic plants; root and tuber specific expression;
patatin gene promoter; the human epidermal growth factor gene; the gene
of hepatitis B surface antigen.
Нашли опечатку? Выделите и нажмите CTRL+Enter
